上皮性卵巢癌中RET基因突变的检测及分析.pdfVIP

中文摘要 中文摘要 背景：卵巢癌是女性生殖器常见的肿瘤之一，发病率仅次于宫颈癌和子宫 体癌而列居第三位，但是其死亡率却居首位【1]，对妇女生命造成严重威胁。卵巢 癌患者死亡率居高不下主要是由于卵巢癌生长部位隐蔽，患病初期很少出现症 状，以致早期诊断困难，确诊时约70％已属晚期，而这些患者的5年生存率只有 30％。因此研究卵巢癌的发生发展机制以寻找早期诊断及预防方法，探索有效的 综合疗法，是提高生存率、降低死亡率的关键。同其他肿瘤一样，卵巢癌的发 生发展亦是与细胞增殖分化相关的原癌基因、抑癌基因多阶段相互作用的结果。 充分认识卵巢癌特异性基因损害的机制有利于制定合理的基因诊断与治疗方 案。RET原癌基因编码一种跨膜的酪氨酸蛋白激酶受体【2J，参与多种细胞内信号 传导途径，从而调节细胞的存活、增殖及分化等过程。RET基因可因突变或重 排而活化，导致细胞异常增殖而形成肿瘤，已经证实与多种人类癌症密切相关。 目的：本研究旨在检测RET原癌基因在上皮性卵巢癌中的突变情况，分析 其在卵巢癌发生发展过程中的作用，以期寻找卵巢癌早期筛查和诊断的指标。 方法：选取69例上皮性卵巢癌组织和11例正常卵巢组织，所有标本均经病 理证实，且术前未进行化疗。手术切除标本立即置液氮速冻，后转．80℃保存。 v2．5序列分析软件对测序结果进行 产物序列直接进行双向测序。应用SeqScape 分析，然后提取RET突变患者石蜡包埋的正常组织DNA进行RET基因测序分 析。 结果：69例卵巢癌标本中检测出3种新的RET基因突变：第8外显子525 第11外显子641密码子由GCU突变为ACU，所编码氨基酸由丙氨酸变为苏氨 由蛋氨酸变为苏氨酸(Metl009Thr)。3种突变均为杂合性错义点突变，总突变 率均为4．35％(3／69)，正常卵巢中未检测到这3种突变，但两组标本中RET基 因突变率无显著性差异(x2=0．02，P0．05)。在RET基因突变患者正常组织中 中文摘要 未检测到RET基因突变，说明突变属于体细胞突变。另外，在所有标本检测出 rsl799939)，在两组标本中分布无显著性差异(P0．05)。 结论：上皮性卵巢癌组织中存在RET原癌基因体细胞突变，且突变位点为 首次发现的新位点。但是突变率较低，还不能说明RET基因突变与上皮性卵巢 癌有关，有待进一步探索。中国人卵巢癌组织及正常卵巢组织中存在3种RET 基因的非同义性单核苷酸多态性位点，但两种组织中等位基因分布频率均无显 著差异，不能表明RET基因的这3种多态性与卵巢癌相关。 关键词：上皮性卵巢癌，RET基因，突变，PCR，双向测序 Abstract Abstract rate ovariancanceristhethird allthe incidenceof among Background：The itsdeathrateisthefirst．The ofovarian tumors，while earlydiagnosis gynecologic ofthehidden areasandunobvious at cancerisdifficultbecause growing symptoms when about70％of are as ovariancancer late。stage earlystage，SO