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植物光合和呼吸作用气孔导度和蒸腾速率的测定
植物光合和呼吸作用、气孔导度和蒸腾速率的测定
一、实验目的和要求
1、了解改良半叶法、氧电极法测定光合作用和呼吸作用的基本原理,掌握红外线CO2分析仪法测定光合作用和呼吸作用,蒸腾速率和气孔导度测定的基本原理。
掌握用LI-6400测定光合作用、呼吸作用、蒸腾速率和气孔导度的方法,测定光-光合响应曲线的方法。
二、实验内容和原理
1、熟悉仪器基本结构,及按装调试。
2、以玉米和蚕豆植物为材料,用LI-6400portable photosynthesis system测定它们的光合作用、呼吸作用、蒸腾速率和气孔导度及光-光合响应曲线,分析其属于玉米或蚕豆阴叶或阳叶。
3、Principles for measuring photosynthesis and respiration
6CO2+6H2O 6(CH2O)+6O2
测干重——改良半叶法:同面积光暗叶片重量差。使用三氯乙酸(TCA)涂抹在叶片叶柄处,阻断叶片在进行光合作用的时候向外输出营养物质。测定的为总光合作用量。
测放O2 ——氧电极法。气相和液相。氧电极的原理:氧电极是由嵌在有机玻璃上的铂和银所构成,以0.5mol/L KCl为电解质,电极头外覆盖一层聚乙烯或聚四氟乙烯薄膜,其厚度在15~25μm之间,用“〇”形套膜环固定,使电极与被测溶液隔离,而溶解在溶液中的氧仍能透过薄膜,进入电极内。较薄的膜易透过氧,因而对氧浓度变化的响应时间短
红外线CO2分析仪法:CO2吸收4260nm红外线
有封闭式:单位时间内CO2下降量 和开放式:参比室和叶室CO2差值
本实验将采用开放式测得。
测量蒸腾速率和气孔导度——蒸腾速率上升,产生更多的水,相对湿度的改变被湿度感受器感知,变化被输入计算机从而输出蒸腾气孔导度。
水分的扩散和二氧化碳扩散存在线性关系,胞间二氧化碳浓度可以通过,蒸腾速率、气孔导度和大气间的二氧化碳浓度计算
定样品室内空气的露点温度而得知其蒸气压。
三、主要仪器设备
1、实验仪器 LI-6400 portable photosynthesis system
3、实验材料 玉米和蚕豆植物
四、操作方法和实验步骤
打开叶室夹好叶片,关紧叶室,按1,F5(Match) → F5(IAGR Match),F1(exit)→开灯,按2,F5(Lamp off)选Quantum fluxenter, 输入光强值(500-1500 )enter →按1,F1(Open Logfile),命名文件名XXX及附加标记(植物,处理,组号等) enter →观察 Photo稳定时,按采样键F1(LOG)或测定器黑钮5次(一般同一叶片应测5次值)。
在完成采样(LOG)后,按5,按F1(AUTOPROG),找Light curve, 名命及做标记enter,按Y(使测量数据紧随上述数据后)。设置光强(从高到低,光强间用1空格隔开。高光强下点间隔大,低光强下点间隔小,常用2000 1500 1000 600 300 200 100 50 30 10 0,光强为0时为呼吸速率),设置测定时间间隔的最小值和最大值,设置叶室和参比室间应进行自动匹配的CO2浓度,按Y开始自动测量。
数据保存和取出。采样完后按1,Close file,按F5,end进入SLEEP(同一班只需一个file,不同的组可以用add mark区分)。与电脑连接,解除SLEEP,进入F5(Utility Manu)选择File exchange mode。打开电脑winPX for 6400,在LI-6400/User下把自己要的测定文件拖入专设目录。在EXCEL下选择所有文件在文本导向下,选择“,”打开。
注意事项:
1、所取材料在植株上的部位要一致,打取叶圆片要避开主脉和伤口,取材以及打取叶圆片的过程操作要迅速,以免失水。
2、压力室法要严格密封,防止漏气。
五、实验数据记录和处理
表1:饱和光下不同植物光合、呼吸和蒸腾速率、气孔导度及水分利用效率(平均值±标准误差)
蚕豆:
Pn (μmol.m-2s-1) R (μmol.m-2s-1) Tr(mmol.m-2s-1) SC(molH2Om-2s-1) WUE 10.8 0.829 1.33 0.125 8.1203 10.8 0.837 1.33 0.125 8.1203 10.8 0.847 1.33 0.125 8.1203 10.8 0.847 1.33 0.125 8.1203 10.8 0.857 1.33 0.125 8.1203 平均值 10.8 0.8434 1.33 0.125 8.1203 标准误差 0.0 0.000114 0.00 0.000 0.0000 表2 玉米:
Pn
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