尿液蛋白质组在IgA肾病激素治疗前后的比较.pdfVIP

Y2283193LLItllIItlIIillllItlIIIlllllt1111 ． 目 录 一、摘要……………………………………………………………………1 (一)中文摘要…………………………………………………………1 DOOOOOOOOOOOO (二)英文摘要………………O 0……………………………3 二、正文……………………………………………………………………5 (一)前言………………………………………………………………5 (二)材料与方法………………………………………………………6 00000……………………… (三)结果…0 0…………………10 OOOOOOO (四)讨论…………O 0…………………………………………20 (五)结论……………………………………………………………24 OOOOOO00……·……………………………··25 (六)参考文献…………O 三、综述…………………………………………………………………28 (一)综述…………………………………………………………28 OOOOOO (二)参考文献……………………………………O OI…………34 四、致谢…………………………………………………………………36 尿液蛋白质组学在IgA肾病激素治疗前后的比较 硕士生姓名： 肖 姣 指导教师： 赵久阳教授 指导小组： 生杰副教授 孙晶娣副教授 专业名称： 内科学 摘要 A 目的：研究初次诊断为IgA肾病(Immunoglobulin 激素治疗前后尿液蛋白质质谱特点，筛选出Ign肾病患者可能的差异性蛋白；同 时对激素的疗效进行评估，探讨尿蛋白质组学对疾病动态监测的意义。 激素治疗前后(应用激素治疗1个月后)的空腹状态下清洁中段晨尿标本，为避 免细菌滋长和蛋白质酶解于l小时内放置于．80℃冰箱保存备用。首先取出18份尿 心沉淀，以去除尿液中的其他微粒，取上清，用．20℃预冷过的有机溶剂(有机溶 剂为乙醇与丙酮按体积l：1配制)按照标本体积与有机溶剂体积比为4：1进行蛋 蛋白质的沉淀物真空干燥浓缩并存于．20(2待用。浓缩干燥的尿蛋白沉淀物用磷酸 中尿蛋白浓度，称取每例样品含lmg蛋白质的混合固体，充分溶解后使用高效液 相色谱法(C18吸附柱)除盐，测的肽峰，获取峰面积及含肽的混合溶液，真空干 燥，最后将干燥后的样品充分酶解，并将个样品的的蛋白浓度调整为1肛∥山后进 行HPLC．ESI．MS／MS分析，获得的尿液蛋白质多肽序列应用MascotDaemon软 hunmanv3．71 件进行数据检索，应用库为ipi reverse．fasta，所获得的人尿蛋白序列 号在Uniprot数据库中检索，查询目标蛋白质的名称、作用等相关信息。 结果：1．6份健康人的尿液样品中共鉴定出98种蛋白质，经手工验证后，所 有健康人的尿液样品共同表达29种蛋白质； 2．6份新诊断为IgA肾病患者激素治疗前的尿液样品中共鉴定出165种蛋白质， 1种蛋白 所有IgA肾病患者激素治疗前的尿液样品共同表达11种蛋白质；将这l 质与健康人尿液所表达的蛋白质进行比较，从中手工剔除相同蛋白质