硼替佐米对淋巴瘤细胞中SHP-1基因表达影响的探究.pdfVIP

中文摘要 硼替佐米对淋巴瘤细胞中SHP．1基因 表达影响的研究 摘 要 目的：淋巴瘤起源于淋巴结和淋巴组织，其发生大多与免疫应答过程 中淋巴细胞增殖分化产生的某种免疫细胞恶变有关，是免疫系统的恶性肿 反应，但多数往往在达到缓解后数月至数年的时间内出现复发。寻求治疗 新药及新方案成了当前的一个紧迫问题。体外和动物实验显示蛋白酶体抑 制剂硼替佐米对包括多发性骨髓瘤、结肠癌、慢性淋巴细胞白血病和胰腺 癌在内的许多恶性肿瘤有抗癌活性，并具有明显的抗淋巴瘤作用，其作用 机制涉及特异性地抑制泛素一蛋白酶体通路(UPP)，从而发挥阻止肿瘤细 胞生长、播散及血管生成的作用，其毒副作用小，并与常规化疗药物无交 叉耐药性。国外基础研究显示硼替佐米体外单药及联合其他药物等均可以 抑制多种恶性淋巴瘤细胞株的增殖。 SHP．1(又称为HCP,SHPTPl，and 构域的非跨膜蛋白酪氨酸磷酸酶，它主要表达于造血细胞且作为关键的调 控因子调节细胞内的磷酸化水平，SHP．1调节不同的跨膜受体胞内信号， SHP．1首先表达在造血干细胞，它特异的下调细胞内跨膜受体信号：即伴 II 它的SH2结构域与抑制免疫受体CD22，CD72，Fc-y：R 号或激活调亡信号，因此，发生在淋巴细胞内的SHP．1机能障碍会导致 淋巴瘤、白血病或其他肿瘤的发生。本实验拟探讨硼替佐米对淋巴瘤细胞 株Raji细胞生长抑制及诱导凋亡的作用，并探讨SHP．1基因在此过程中 所起的作用，为临床寻找新的治疗靶点提供理论依据。 方法：通过细胞培养的方法对淋巴瘤细胞株Raji进行传代培养，用 不同浓度的硼替佐米对其进行处理，于不同时段收取细胞，应用MTT法 中文摘要 检测Raji细胞增殖抑制率，应用流式细胞术检测细胞凋亡率，用实时定 量PCR的方法检测实验组与对照组SHP．1基因mRNA的表达水平。 结果： 1 随着硼替佐米浓度、干预时间增加，Raji细胞增殖均有明显的抑 制作用，存在明显的剂量依赖性和时间依赖性。 2 随着硼替佐米浓度增加，干预时间增加，Raji细胞株凋亡率增加， 存在明显的剂量依赖性和时间依赖性。 3硼替佐米对Raji细胞中SHP．1mRNA表达的影响 SHP．1mRNA相对表达量，P0．05，有统计学意义。 表达水平逐渐升高，P0．05，有统计学意义。 (3)同一药物浓度干预不同时间，随着时间延长，SHP．1表达水平升 高，P0．05，有统计学意义。 结论：硼替佐米对Raji细胞有增殖抑制和诱导凋亡作用，可以上调 SHP一1基因很可能参 SHP．1mRNA的表达水平，呈剂量和时间依赖性。 与了硼替佐米诱导Raji细胞凋亡的调控。 关键词：硼替佐米；凋亡；SHP-l基因；Raji细胞；淋巴瘤 英文摘要 Effectof inhibitorofBortezomibonthe methylation ofSHP一1of celllines Lymphoma ABSTRACT isoneof tumors immunitysystemmalignant Objective：Lymphoma to sourcedfrom nodesand itrelated ti