来源于柠檬酸杆菌的高比植酸酶基因在毕赤酵母中的高效表达.PDFVIP

卷 期 ! 微 生 物 学 报 !（）： !’ ( ’$ 年 月 日 #$$ %# ! !#$ %’()(*(+$ ,-$ ! )*+*,-*. #$$ !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 来源于柠檬酸杆菌的高比活植酸酶基因在毕赤酵母中的高效表达 黄火清，罗会颖，柏映国，王亚茹，姚 斌 （中国农业科学院饲料研究所 北京 %$$$/%） 摘 要：柠檬酸杆菌（ ）来源的植酸酶是目前报道的比活最高的植酸酶。按照毕赤酵母（ !#$%’(#)$ $’’* +(,’ - ’.#%$. ）对密码子的选择偏向性，对来源于柠檬酸杆菌的高比活植酸酶基因/--/ 进行了密码子优化改造。改造后 的基因 （ ）按正确的阅读框架融合到毕赤酵母表达载体 的 因子信号肽编码序列 端，通过电击转化 /--/ 0 ?HIJ 4 0K ! 得到重组转化子。通过 验证， （ ）已整合在酵母染色体上。 分析和表达产物的研究表明，植酸 HJL /--/ 0 M)M4H1N9 酶得到了高效分泌表达，在’O 发酵罐中植酸酶蛋白表达量达到0 A#,GP,O 发酵液，发酵效价达到每毫升发酵液 5 以上，高于目前报道的各种植酸酶基因工程菌株的发酵效价。 %A! Q %$ IR 关键词：高比活植酸酶；基因改造；毕赤酵母；高效表达 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） S5/ 1 $$$%4#$ #$$ $4$!’4$ 植酸酶（ ， 为 ，是目前发现的比活性最高的植 9J0 A %A0 A / A 01% 4:=T:B3 E*87?ET?E7B* 0 A’ Q %$ IRP,G ?ET?EE;U.37T*）是一种可以将植酸降解为肌醇和 酸酶，比目前工业生产并广泛应用的曲霉来源的植 ［ ］ 磷酸的酶，目前已广泛的应用在单胃动物饲料中。 酸酶%$ 高出近 倍。本文报道了此酶编码基因 0’ 植酸酶的应用可提高植酸磷的利用率，减少粪便中 /--/ 的改造及在毕赤酵母中的高效表达，重组菌株 磷的排放量，从而降低环境中的磷污染，并可减少植 有望用于植酸酶的工业化生产，从而进一步大幅度 ［］ 酸的抗营养作用% 。 降低植酸酶的生产成本。 植酸酶已经成为饲料添加剂和酶制剂研究的热