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生产实习报告 2010—2011学年第二学期 姓 名： 学 号： 专业班级：生物工程08级（1）班 实习时间： 指导教师： 实习单位： 农业科学院蚕业与农产品加工研究所实习报告 1 前言 我于农业科学院蚕业与农产品加工研究所粮油加工实验室进行为期两个星期的实习，主要学习如何从大米中提取酚类物质及研究大米抗氧化活性变化。 多酚是一种植物单宁(Vegetable tannins)，又称植物多酚(Plant Polyphenol)是一类广泛存在于植物的皮、根、叶、果中的多元酚化合物，含量可达20%。植物单宁是植物的次生代谢产物，属于天然有机化合物，赋予植物酸、甜、苦、涩的味道，有助于植物防御病原、害虫等危害。尽管多酚广泛存在于植物性食物中，但是植物中多酚的含量受诸多因素影响，如成熟程度，品种、加工过程及储存条件等。多酚类化合物的提取分离方法多种多样，我们的实验是用有机溶剂提取多酚，利用高效液相色谱法进行检测分析大米中的物质，并用福林比色法测定大米中多酚的含量。冷冻是一种常用的有效保藏手段，以冷冻状态的大米粉为原料进行多酚的提取，则可避免原料稳定性的问题。有机溶剂提取法不需要特殊的仪器，但存在产品安全性低、耗时长、提取率低等缺点。且不同的有机溶剂的提取效果不同，故同一个样品我们用了不同的有机溶剂提取，通过比较吸光度确定最佳的提取方法。 1.1 实习目的 在实习过程中，提高动手能力和思考能力，通过实习单位加深对本专业的就业方向的了解。 1.2 实习地点：广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所 1.3 实习时间：2011年月日2011年7月日400g离心机：4000r/min 7、SB-1100旋蒸仪 8、1ml无菌注射器 9、UV-1800 紫外可见分光光度计 10、恒温振荡器 11、液相色谱仪 12、移液枪（20-200ul、100-1000ul、1000-5000ul） 2.3 稻米发芽过程中酚类物质含量及抗氧化活性变化研究 2.3.1 样品：稻米、糙米 2.3.2 发芽工艺流程 1、稻米 砻米 筛选 清洗 消毒 浸泡 发芽（芽长1mm-2mm） 真空干燥 2、对照试验：稻米和糙米均使用未浸水样品，浸水后直接干燥，发芽开始后8h、16h、24h、32h四个时间点取样 2.3.3 测量指标 a、稻米发芽势 在被测糙米中随机抽取四份样品，每份100粒，将糙米用无菌水冲洗后，置于20度无菌水中浸泡8h，然后将糙米排列在滤纸发芽床上，放入30度得消毒发芽箱内，相对湿度90%，糙米的发芽势测定时间为26h，对发芽的糙米进行计数，结果计算公式如下： b、发芽过程中6个取样点稻米吸水率以及水分含量 c、发芽过程中6个取样的多酚含量、抗氧化活性及其组分变化 2.3.4 操作要点 1、首先预实验确定发芽浸泡过程中稻米的吸水率，根据吸水率在后来浸泡过程中确定加水量。 2、筛选：糙米过筛，除杂后选取大小均一致的糙米。 3、清洗：用自来水冲洗三遍，洗去表面的糠粉和灰尘，沥干。 4、消毒：用1%的次氯酸钠消毒5min，再用无菌水清洗糙米。 5、发芽：将稻米、糙米（各15g）均匀摊放于经消毒的培养皿中，盖上已消毒纱布，喷洒无菌水，置于30度恒温培养箱内培养32h，湿度90%。 6、真空干燥：发芽结束后，将发芽稻米、发芽糙米放入烘箱真空60 烘干。 2.4 从大米中提取游离酚的方法 2.4.1 样品预处理：稻谷风干至水分降至约13%，室温下贮藏3个月，去壳，碾磨至米糠约为10%，过40目筛，冷冻贮藏备用。 2.4.2 测样品湿度 2.4.3 实验步骤 方法一： ZS和ACC米糠粉各2g 加入50ml 80%丙酮，冰浴上均质5mins 天平平衡后离心4000r/min 10min 重复提取1次 合并两次上清液 45旋蒸至无水状态 转移收集的提取液至10ml容量瓶，蒸馏水定容 移1ml至‘1.5ml离心管’，备2管，8ml至‘15ml离心管’， 冷冻贮藏备用。 方法二： 2g ACC米糠粉，用50ml冷冻酸性甲醇提取，旋蒸后用蒸馏水定容至10ml，实验过程如同方法一。 方法三： 2g未发芽大米米糠粉，用50ml冷冻酸性甲醇提取，旋蒸后用冷冻酸性甲醇定容至10ml，实验过程如同方法一。 方法四： 2g 未发芽大米米糠粉、发芽17h、35h、47h稻米米糠粉，用50ml 80%乙醇提取，旋蒸后用蒸馏水定容至10ml，实验过程如同方法一。 方法五： 2g 未发芽大米米糠粉、发芽17h、35h、47h稻米米糠粉，用50ml 80%乙醇提取，旋蒸后用甲醇定容至10ml，实验过程如同方法一。 2.4