维生素C,可滴定酸,可溶性固形物测定方法.docVIP

（一）总含糖量的测定 1．原理：手持糖量计法 手持糖量计通过测量水溶液的折射率来测量其浓度的仪器。所有水溶液都能使光的方向发生偏折。光的偏折可以随溶液浓度的增加而成正比增加。糖度折光仪用于快速精确测定含糖溶液的溶度。 2．仪器：WYT手持糖量计 3．试验步骤：①取各对照新鲜的水蜜桃（番茄）5g左右，用研钵研磨成匀浆，研磨过程中注意不要使温度过高。 ②掀开进光棱镜盖片，用柔软绒布仔细的将折射棱镜拭净，擦拭过程中注意不要将镜面划损。 ③将研磨得到的液体数点滴于折射棱镜上，将棱镜盖合上，然后将糖量仪对向光源或明亮处。 ④然后旋动目镜调焦手轮，使得视场内分化线清晰可见为止；标线上明暗分界线即糖液的浓度数，读取并记录好数据。 表2 各对照TTS记录表： 处理 水蜜桃质量（g） 可溶性固形物（%）备注：固形物除以水蜜桃质量 处理Ⅰ（多少处理浓度） 处理Ⅱ（多少处理浓度） 处理Ⅲ（多少处理浓度） 处理Ⅳ（多少处理浓度） 对照（ck）（多少处理浓度） （二）可滴定酸的测定 1．原理：酸碱中和转移法 水蜜桃（番茄）中的有机酸，用氢氧化钠标准溶液滴定，以酸度计测定终点，用消耗的氢氧化钠标准溶液的体积计算总酸量。 2．试剂：蒸馏水，氢氧化钠标准溶液（0.1mol/L），KHC8H4O4，酚酞指示剂。 3．步骤： ① 氢氧化钠标准溶液（0.1mol/L）制备：电子天平，迅速称取分析纯氢化钠4g，溶于蒸馏水中稀释到1000ml，摇匀； ② 氢氧化钠标准溶液的标定：精确称取120℃烘2h以上的基准试剂邻苯二甲酸氢钾（KHC8H4O4）0.3～0.4g（精确至0.0001g），放入250mL锥形瓶中加蒸馏水约100mL溶解，加入1%酚酞指示剂2～3滴。用以上配制好的氢氧化钠溶液滴定，至显微红色30s不退色为终点。记录消耗氢氧化钠溶液的毫升数，平行试验3～5 次，取平均值。同样条件下取100mL蒸馏水作空白试验。记录消耗氢氧化钠的毫升数； 表3 可滴定酸对照表： 处理 水蜜桃的质量（g） NaOH消耗量(ml) 可滴定酸含量（%）备注：可滴定酸除以水蜜桃质量 V1 V2 V3 V蒸馏水对照 处理Ⅰ（标注多少处理浓度） 处理Ⅱ（标注多少处理浓度） 处理Ⅲ（标注多少处理浓度） 处理Ⅳ（标注多少处理浓度） 对照（ck）（标注多少处理浓度） （三）测定维生素C1。原理：2,6-二氯酚靛酚法 L-抗坏血酸（Vc）中的—C=C—基具有还原性，还原型L-抗坏血酸能与氧化剂染料2,6-二氯酚靛酚作用，染料本身被还原成无色的衍生物，同时还原态的L-抗坏血酸被氧化成无色的脱氢L-抗坏血酸。 一定量的样品提取液还原标准染料的量与样品中所含Vc的量成正比。染料2,6-二氯酚靛酚在中性或碱性溶液中呈蓝色，在酸性溶液中呈粉红色。 用2,6-二氯酚靛酚滴定样品，在达到终点之前，滴下的2,6-二氯酚靛酚立即被还原成无色；当溶液中的L-抗坏血酸被消耗完时，滴下的过量的2,6-二氯酚靛酚在酸性体系里呈现粉红色。所以当溶液从无色转变成微红色时，即为滴定终点。2。试剂的配制? 草酸溶液（2%）每组配制250mL 2,6-二氯酚靛酚溶液??????? 分别称取2,6-二氯酚靛酚300mg、碳酸钠300mg，用热蒸馏水200mL溶解并定容至3000mL（过滤除去难溶颗粒，置于棕色瓶中，贮于冰箱中备用。有效期一周，使用前需标定。）操作步骤????样品液的制备??? 取材：称取新鲜10g左右，准确记录称样量再称量2.5g草酸， 与样品一起用纱布包裹住。??? 研磨：样品包置研钵中，加15mL2%草酸，用研棒挤压样包，将样品充分磨细。 将汁液转移到100mL容量瓶中。残渣再加15mL2%草酸，继续研磨，汁液再合并到上述容量瓶中。如此反复研磨2～3次，合并汁液。??? 定容：最后用2%草酸定容至V=100mL，摇匀备用。???? 样品的测定??????? 吸取汁液20mL，放入100mL锥形瓶中，立即用2,6-二氯酚靛酚溶液滴定至出现粉红色在15秒内不消失为止。记录所用滴定液体积。平行操作三次得V1，V2，V3，取平均值V。??? 空白测定??????? 取2%的草酸液20mL，放入另一100mL锥形瓶内，用2,6-二氯酚靛酚滴定至终点，记录染料用量V0。 结果处理??? 计算你所取生物材料中Vc的含量（单位用mg/100g鲜重）。g） 2,6-二氯酚靛酚Vc含量（mg/100g） V1（mL） V2（mL） V3（mL） V（mL） Ck V0 处理Ⅰ（标注多少处理浓度） 处理Ⅱ（标注多少处理浓度）