实验二 FeCl3中微量铁及测定.ppt

实验二 FeCl3中微量铁的测定 目的 掌握使用分光光度计. 掌握标准曲线法进行定量分析 掌握分光光度法测定药物或水中铁含量的操作方法及原理. 原理 铁是药物和水中常见的一种杂质,含量大时易产生特殊气味,因此对药物和饮水中的铁要进行检查和测定. 选择显色剂的基本原则 亚铁离子与邻二氮菲生成稳定的橙红色配合物. Fe2+ + 应用此反应可测定铁,当铁以Fe3+离子形式存在于溶液中时,可预先用还原剂(盐酸羟胺或对苯二酚等)将其还原为Fe2+离子. 及显色条件的选择 显色时,溶液PH值应为2～9.若酸度过高(PH2）显色缓慢而色浅;若酸度过低,二价铁离子易水解.最大吸收波长为508nm,ε= 11100. 仪器与试剂 (1)722型分光光度计 (2)容量瓶(10ml，7个); (3)吸量管(2,1ml) (4)洗耳球 (5)擦镜纸 (6)标准铁溶液(20μg/ml) (7)邻二氮菲0.1%水溶液 (8)盐酸羟胺1%水溶液(用时配制) (9) HCA-NaAc缓冲溶液 (10) FeCl3待测液 四.操作步骤 1.标准曲线的制作 以标准溶液的浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制成A-C曲线即为标准曲线。 具体步骤： 在6只10ml容量瓶中，用吸量管分别加入0.0,0.4,0.8, 1.2,1.6,2.0ml 铁标准溶液(硫酸铁铵每ml含Fe3+20μg),分别加入 0.2ml盐酸羟胺,0.4ml邻二氮菲,1.0ml HAc-NaAc缓冲溶液,用水稀释至刻度后摇匀,放置5min.用1cm比色皿,以0.0ml铁标液为试剂空白,在所选波长(508nm)下,测量各溶液的吸光度.以铁含量为横坐标,吸光度A为纵坐标,绘制标准曲线. 2.FeCl3样测定 标准曲线制备实例 　　精密称取对照品1.110mg用甲醇溶解并定容至10ml，用移液管精密移取0.4ml,　0.8ml，1.2ml，1.6ml，2.0ml，2.4ml分别定容于10ml容量瓶，以此为对照溶液，在268nm下测其吸收度，测定结果见表Table2 Table 2 Linear Relationship of Standard Material 　 NO. 　contents of standard A material(mg/l) 　　 1 4.4400 0.092 2 8.8800 0.187 3 13.320 0.277 4 17.760 0.365 5 22.200 0.458 6 26.640 0.553 对对照品的吸收度和浓度进行线性回归，得回归方程： A=0.02063C+0.0014 γ = 0.99993 (A:吸收度，C:浓度) 标准品在4.440~26.640mg/L范围内A与C呈良好线性关系。 以对照品溶液的浓度为横坐标，吸收度为纵坐标，绘制标准曲线，见Fig3。 以对照品浓度对吸收度作图，得直线，见Fig3 思考题 显色反应操作中,加入的各标准溶液与样品液的含酸量不同,对显色有无影响? 据制备标准曲线测得的数据,判断本次实验得浓度与吸光度间的线性好不好,分析其原因. 注意事项 待测溶液装量应超过比色皿2/3，但也不能装得太满。 实验过程中，注意不要将溶液撒入机器内部，如果发生上述情况，请及时清理干净。 比色皿用后，请洗净后，用95%乙醇浸泡，长期不用，请擦干后，收好. 附：722型分光光度计使用方法 开机后需预热20分钟。 波长设定需从短波向长波方向调整。 调零需在透射比模式下将比色皿架置于调零档。 调满度时将空白样品置于光路，按100%T（OA）键。 按方式键可实现透射比，吸光度方式转换。 波长改变后千万不能忘了再调到零和调满度。 * * 以FeCl3为样品,准确吸取样1.00ml(或适量), 置10ml容量瓶中.按上述制备标准曲线的方法配制溶液 并测定吸光度 ,根据测得的吸光度求出FeCl3样中总铁量. 据FeCl3样测得吸光度查出铁含量. （1）在相同条件下测定样品溶液的吸光度，即可从标准曲线 查出样品溶液中被除测组分的浓度， （2）将一系列标准