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微生物微波诱变育种的研究
微波诱变在微生物育种中的应用摘要:微波诱变是一种比较新兴的非电离电磁辐射物理诱变育种技术,已经用于微生物诱变育种研究中。本文综述了微波诱变作用阶段及其机理、诱变实验方法、影响诱变效果的因素,并对微生物微波诱变育种研究现状、优势及不足做了讨论。关键词:微波诱变,诱变育种,微波生物效应Application of microwave mutagenesis in microorganism breedingAbstract: Microwave mutagenesis has become a new physical mutation technique by non-ionizing electromagnetic radiation,which has been used in the breeding of microorganisms. This article reviews possible mechanisms of microwave mutagenesis,methods of microwave mutation technique together with main factors probably affecting microwave mutagenesis,and research in the application of microwave mutagenesis in microorganism breeding.Meanwhile,the present research status,advantage and disadvantage,and prospect of this technique are also discussed focusing on its application in the microorganism breeding.Key words: microwave mutagenesis,mutation breeding,biological effect of microwave目前,微生物在解决人类的健康、能源、资源和环境保护等问题中正显露出越来越重要且不可替代的独特作用。微生物应用研究的难题最终归结为通过遗传育种方法获得高产的菌株。而在微生物育种工作中,诱变育种以其操作简便诱变手段多样,且收效明显而成为实验室及生产上最为常用的目的菌株选育方式,特别是对遗传背景不很清楚的对象,诱变育种更是育种方法的首选。目前,国内外常用的诱变方法有物理诱变方法、化学诱变方法及生物诱变方法。化学诱变剂(如一些烷化剂 EMS、NTG等)大多是致癌剂或剧毒药品,使用时须十分谨慎,生物诱变则需要极其精密的操作,并且整个实验过程较长,所以物理诱变成为一种较好的选择[1-2]。物理诱变中应用较多的是辐射诱变,微波作为一种辐射诱变剂具有显著的成效,已经形成微波诱变微生物技术。与其他诱变方式相比微波诱变具有操作简单、安全、变异率高、辐射损伤轻等优点。而微波与其他诱变剂的复合处理也具有诱人的诱变效果。到目前为止,国内外关于微波诱变微生物已做了大量的研究工作。概括起来,微波在诱变微生物技术方面取得了卓有成效的发展[2-3]。1 微波诱变作用阶段及其机理微波诱变作为辐射诱变中的一种,具有辐射诱变的三个作用阶段:(1)物理作用阶段:生物有机体内的遗传物质某分子部位受到不同能量辐射后,可能产生不同的核物理效应。而当受到的辐射能量足以使该电子脱离原子核吸引,则会导致“离子对生成”。(2)化学反应阶段:当被照射后的遗传物质分子失去电子或得到电子后,则形成“离子对”及“自由基”,其活跃程度大大增强,带不同电荷的基团极有可能发生分解或聚合反应,从而导致新的化学成分产生。(3)生物学阶段:当遗传物质本身受到辐射后,电离和分子重组的结果可能导致DNA断裂、交换、畸变,直接影响了DNA复制或碱基序列改变,从而导致遗传上的变异,人们往往称这种效应为“直接效应”。有时这种电离现象和离子对形成不是直接发生于DNA分子上,而是与之相邻的分子或水分子,从而产生具有强氧化或还原能力的基团。这些基团进一步作用于遗传物质,引发DNA的各种异常,人们常称这种效应叫“间接效应”。从上述三个可能发生的阶段来看,化学变化及生物学变化的发生并非是必然的。当受辐射部位得到的能量较小时,可能只发生物理作用阶段,而不导致生物学变化,这也就说明了为什么正常的日光照射并不能诱发生物产生变异,也是生物稳定遗传的基本保障。微波辐射属于一种低能电磁辐射,具有较强生物效应的频率范围在300 MHz-300 GHz,这种生物效应包括热效应和非热效应两种[4]。热效应是指一定频率和功率的电磁辐射照射在生物体上,引起局部温度上升,从而引起一些生理生化反应,甚至死
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