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cry8E启动子指导的非晶体蛋白GabR在苏云金芽胞杆菌HD73菌株中
微生物学通报 Feb. 20, 2014, 41(2): 290296
Microbiology China © 2014 by Institute of Microbiology, CAS
tongbao@ DOI: 10.13344/j.microbiol.china.130199
研究报告
cry8E 启动子指导的非晶体蛋白GabR 在苏云金芽胞杆菌
HD73 菌株中的表达
刘春霞 武建博 彭琦 曲宁 邱丽丽 张杰 宋福平*
( 中国农业科学院植物保护研究所 植物病虫害生物学国家重点实验室 北京 100193)
摘 要: 【目的】利用cry8E 基因启动子指导的高效表达载体 pHT315-8E21b ，构建一个能够在
苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis ，简称Bt) 中正确表达非晶体蛋白 GabR 的重组菌株。【方
法】将苏云金芽胞杆菌中的功能基因 gabR 装载到 cry8E 基因启动子指导的高效表达载体
pHT315-8E21b 上，转入到 HD73−无晶体突变株后获得重组菌株 HD-8E-gabR 。通过 SDS
和凝胶阻滞等方法对 GabR 蛋白的表达和功能进行分析。【结果】通过SDS及蛋白定量
等方法首次证明了在Bt 表达体系中cry8E 基因启动子指导的高效表达载体能够表达非晶体蛋白
GabR ，且通过碱裂解的方法可以提高 GabR 蛋白在 Bt 系统中的溶解性。进一步凝胶阻滞试验
证明 GabR 能与其调控启动子 PgabT 结合。【结论】证明了cry8E 基因启动子指导的 Bt 表达系
统具有大量表达非晶体类蛋白的能力。
关键词: 苏云金芽胞杆菌，cry8E 启动子，GabR 蛋白，表达载体
Expression of GabR protein in Bacillus thuringiensis HD73 strain
directed by cry8E promoter
LIU Chun-Xia WU Jian-Bo PENG Qi QU Ning QIU Li-Li ZHANG Jie
*
SONG Fu-Ping
(State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests, Institute of Plant Protection , Chinese Academy of
Agricultural Sciences , Beijing 100193, China)
Abstract: [Objective] To express a non-crystal protein GabR in Bacillus thuringiensis , the B .
thuringiensis expression system directed by cry8E gene promoter was constructed and verified.
[Methods] The gabR gene of B. thuringiensis was cloned into the high-level expression vector
pHT315-8E21b initia
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