直肠癌磁共振血氧水平依赖成像及乏氧标志物表达的相关研究及其评价术前放化疗疗效中的作用.pdfVIP

·中文论著摘要· 直肠癌磁共振血氧水平依赖成像与乏氧标志物表达的 相关研究及其评价术前放化疗疗效中的作用 刖吾 直肠癌是最常见的消化道肿瘤之一。磁共振成像由于具有较高的软组织分辨 率及多方位、多序列、多参数成像等优点，可直观显示肿瘤，准确判定肿瘤部位、 浸润深度、侵犯范围及淋巴结转移等情况，是目前能够准确判断病变进展程度及 决定手术切除范围的检查方法。 level 血氧水平依赖磁共振成像(bloodoxygen dependentmagnetic resonance relaxation 旋弛豫率(apparentspin—spin rate，R2*)变化，可以动态和非侵入 性地跟踪氧代谢和血液动力学变化的成像技术，BOLD成像技术已广泛应用于头部、 肾脏研究，本研究在国内首次将其应用于直肠癌乏氧和放化疗疗效评估。 在肿瘤组织内，氧分压情况影响肿瘤生长、侵袭、转移能力以及肿瘤对放化 Q的表达 疗的敏感性。HIF-1Q是机体适应缺氧的一种核心转录调节因子，HIF-1 作为肿瘤内源性乏氧标志物。HIF-Ia通过激活VEGF基因的表达进而促进肿瘤血 量研究证实CDl05的强表达，是内皮细胞增殖的标志之一，其表达程度可以反映 肿瘤不成熟的新生血管情况。 目的 本课题通过对直肠癌BOLD影像研究，探讨BOLD-MRI评价直肠癌乏氧、血管 生成情况及其浸润、转移的应用价值，以及对直肠癌放化疗疗效早期预测和评估 的应用价值，为临床治疗提供依据。 材料和方法 l、临床资料 完整手术病理结果，于术前2周内行磁共振常规平扫及BOLD成像，其中有7例患 者于前、后两天分别行二次BOLD成像，所有患者均未进行放化疗。其中男性32 例患者病理结果均为腺癌。 患者l临床分期为临床分期为II、III期，即T3-4No-zMo患者，所有均有术前活检证实。 入组患者于术前接受联合放化疗。于放化前一周内、放化疗开始2周行BOLD-MRI 检查。 2、BOLD成像扫描方法、图像后处理及分析 (1)BOLD成像扫描方法 采用美国GE公司SignaHDx3．OT磁共振扫描仪，8通道体部相控阵线圈。患 者检查前禁食、水6小时；检查前40分钟口服山莨菪碱20rag；患者仰卧位， 自由呼吸并部分充盈膀胱。先完成矢状位T：wI，再完成横轴位T。WI和T：WI及冠 状位T2wI扫描。最后利用采用多梯度回波序列(mutiplegradient—echo 直病变段肠管完成BOLD图像扫描。 (2)图像后处理及分析 件自动生成R2*和T2*图像，首先由两个观察者分别评价BOLD图像质量级别， 选取轴位或矢状位病灶最大层面，根据病变的大小、形态手动绘制感兴趣区 of (RegionInterest，ROI)，每个病灶经3次测量取其平均值作为感兴趣区的 R2*值。 3、病理标本处理及免疫组织化学方法 (1)切片制作 对所选病例的石蜡包埋组织行连续切片，切片厚5um，连续切片5张，第一 张切片行HE染色，其余4张用于免疫组化染色。 (2)免疫组织化学实验方法 Q、CDl05 采用链霉亲和素一生物素一过氧化物酶复合物法(SABC)染色。HIF一1 抗体及SABC试剂盒均购自武汉武汉博士德生物工程有限公司。已知的阳性直肠癌 切片作为阳性对照，阴性对照用PBS缓冲液代替一抗染色。 (3)免疫组织化学结果判断 HIF—l a阳性结果判定标准：HIF-1a在石蜡切片中阳性染色主要定为于细胞 质，部分胞核着色，呈现棕黄色颗粒，根据肿瘤细胞显色的比例及染色强度进行 达的染色结果判定g阳性细胞着色部位主要位于血管内皮细胞的胞膜和胞浆，胞膜 着色强于胞浆。每张切片记录5个“热点，取其平均数作为该病例的CDl05表达 计数，即MvD。 4、术