清络方活性部位物质基础的分析研究.pdf

中文摘臻 清络方活性部位物质基础研究 (中文摘要) 中药复方是中医临床治疗最主要的特点之一，研究中药复方作用的物质基础在中 医药现代化过程中具有重要意义。本研究以针对类风湿性关节炎湿热阻络证的代表方 剂一清络方为研究对象，分五个部分对其活性部位的物质基础进行研究。 第一部分文献研究 总结了清络方酶临床应用和现代研究(前言部分)，并对组成清络方复方的三个擎 昧药苦参、青风藤、黄柏的化学成分和药理活性进行综述。共引用文献213篇。 第二部分清终方活性部位制各工艺及其药效初步评价 首先以总生物碱含量为指标，优选了清络方的提取方案；接着以尽可能保留复方 的多种有效成分为目标，对多种树脂的富集纯化效果和工艺流程的合理性进行考察 后，优化制备工艺流程，得到清络方活性部位；并对该制备工艺进行验证，3批样晶 的制备和含量测定结果显示制备工艺稳定。 采用酸性染料比色法建立了清络方活性部位总生物碱的定量测定方法，结果表明 方法精密性和重现性良好，回收率符合要求，可作为清络方活性部位的质量控制方法 之一。 本部分还对清络方活性部位的药效进行初步评价。①选择巴豆油致小鼠耳肿胀反 应和醋酸致小鼠扭体反应两个模型分别考察了抗炎和镇痛活性，表明清络方活性部位 具有良好的抗炎镇痛作用。②研究了清络方活性部位对胶原诱导性关节炎大鼠的影 响，实验表明清络方活性部位能有效地改善胶原诱导性关节炎大鼠关节肿胀，降低其 血清中抗II胶原抗体含量，提示其对胶原诱导性关节炎大鼠有治疗效果，并在抗血管 新生方面表现出一定的作用。 第三部分清络方活性部位及君药苦参黄酮部位的化学成分研究 谱学技术和化学方法)对清络方活性部位和君药蔷参黄酮部位的化学成分进行系统研 究，共分离鉴定了26个化合物。u ①首次对清络方进行化学成分研究，从其活性部位中分离鉴定了17个化合物； 其中生物碱9个，苯丙素类2个，内酯类2个，甾体类2个，黄酮苷类1个，长链烷 酸类1个。 其中的2个化合物：石虎柠檬素A和芷二十六烷酸属酋次在组成清络方的三味中 药苦参、青风滕、黄柏中发现；根据结构类型和生源途径判断石虎柠檬素A很可能来 源予黄粕，丽正二十六烷酸应该来源于蓍参。 其余的15个化合物为清络方各单味药已有报道的化合物。根据文献可以推测莆 清络方活性部位物质糕础研究 2 一 参碱、槐果碱、氧化苦参碱、’氧化槐果碱、三叶豆紫檀苷来源于苦参；青藤碱、尖防 己碱、尖防己定碱来源于青风藤；小檗碱、巴马汀、黄柏内酯来源于黄柏；丁香苷、 丁香脂素．4，4-0．双．D．D．葡萄糖苷在青风藤、黄柏中均有发现；p．谷甾醇、胡萝b苷 在三昧中药中均有发现。 ②苦参为清络方的君药，对苦参黄酮部位进行化学分离和结构鉴定，旨在为清 络方指纹图谱的建立和活性筛选提供单体化合物。 从苦参黄酮部位中分离鉴定出9个化合物，其中正二十六烷酸属首次从苦参中获 得。其他8个化合物分别为苦参酮、降苦参酮、三叶豆紫檀苷、芒柄花素、苦参醇O、 B．谷甾醇、胡萝b苷、蔗糖。 第四部分君药苦参药材中苦参酮与降苦参酮的含量测定 建立了同时测定君药苦参药材中2种典型黄酮一苦参酮和降苦参酮含量的高效液 相色谱法，为苦参药材及其中药(复方)制剂质量控制与评价提供参考；尤其是对苦 参酮的含量测定，本研究之前尚未见文献报道。 X Gemini mm4．6 采用Phenomenex mm，51．tm)，以乙腈一水(50：50) C18色谱柱(250 为流动相，流速1．0mL／min，检测波长290nm。结果表明：苦参酮和降苦参酮的线性 范围分别为0．3186--1．5930 Pg(厂=0．9999)；苦参药 1．tg(，-=0．9998)，O．11280．564