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培养基配方及配置 根据其作用不同，培养基分为： 诱导培养基 增殖培养基 生根培养基 根据其营养水平不同，培养基可分为基本培养基和完全培养基。 基本培养基（就是通常称呼的培养基）主要有MS、White、 N6、B5 、改良MS、Heller、Nitsh、SH、 Miller等。 完全培养基就是基本培养基的基础上，根据试验的不同需要，附加一些物质，如生长调节物质和其他复杂有机物质等。 N6培养基特点： 1974年朱至清等为水稻等禾谷类作物花药培养而设计 成分简单 KNO3 和 (NH4)2SO4含量高 广泛应用于小麦、水稻及其它植物的花药培养等 White培养基特点： 1943年由Ｗhite为培养番茄根尖而设计的。1963年又作了改良，称作Ｗhite改良培养基 。 特点：无机盐含量较低 适用：生根培养。 B5培养基特点： 含较低的铵 双子叶植物 尤其木本植物组培可选择 MS培养基特点： 无机盐、离子浓度高，硝酸盐含量较高。 MS培养基是目前应用最多最普遍的培养基。无机盐的浓度较高，能保证组织培生长所需的矿物质营养。并且因为离子浓度高，在配制、贮存、消毒过程中，即使有些成分略有出入，也不致影响培养基中的离子平衡 培养基配方明细表： 培养基成分： 一、无 机 盐 ： 氮 枝叶生长需要氮素，缺氮老叶先发黄；氮过量，枝叶过度茂盛 。 磷 缺磷，植株生长缓慢，老叶暗紫色。 钾 促进花卉生长健壮，增强抗性，茎秆挺拔。缺钾，叶尖、叶缘枯焦，叶片呈皱曲状，老叶发黄或火烧状。 钴 缺钴，叶片失绿而卷曲，整个叶片向上弯曲凋枯。 二、有机物 碳水化合物：选用种类：蔗糖（或葡萄糖、果糖）等 蔗糖浓度：2%～3%，胚培养为4%～15% 大生产时可用白糖 糖在培养基的作用： 1）为细胞提供合成新物质的碳骨架 2）为细胞的呼吸代谢提供底物和能量 3）维持渗透压 维生素 种类： VB1（盐酸硫胺素）、VB6（盐酸吡哆醇）、 VB3（烟酸）、Vc（抗坏血酸 浓度：0.1－1.0mg/L 作用：VB1 促愈伤组织产生，提高活力 VB6 促根生长 Vc 防组织褐变 VB3 与植物代谢和胚的发育有关系 氨基酸：甘氨酸、精氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、天冬氨酸、 天冬酰胺、丙氨酸等等。因培养基的种类不同，其种类和浓度不同。 肌醇：又称环己六醇，在糖类的转化中起作用 天然复合物 椰乳：促愈伤组织和细胞培养，用量10－20%，使用注意茎尖大小 香蕉泥：用量150－ 200ml/L ，应用在兰花组培 马铃薯汁液：用量150－200g/L，使苗壮 水解酪蛋白：浓度100－200mg/L，应用在微茎尖培养 三、激素 自然界中，植物激素是植物新陈代谢中产生的天然化合物，它能以极微小的量影响到植物的细胞分化、生长、发育，影响到植物的形态建成、开花、结实、成熟、脱落、衰老和休眠、萌发等许多生理生化活动。 在培养基中，其各种成分对培养物影响最大的最显著的就是激素。激素的种类、浓度、以及配比都会显著的影响愈伤组织的形成、不定根、不定芽的分化，胚状体的形成等。 通常，不同植物，或不同品种，甚至同一植物的不同位置对激素的要求有很大的变化，这主要取决于植物的内源激素水平。 组织培养中使用的激素有的是天然的，如脱落酸（ABA）等，有的是合成的，如二氯苯氧乙酸（2，4－D） （一）、激素的种类： 1、生长素类： 在自然界中，生长素影响茎和节间的伸长、向性、顶端优势、叶片脱落和生根等现象 在组织培养中的主要作用是：诱导细胞的分裂和根的分化，诱导愈伤组织） 组织培养中常用的生长素： 1 二氯苯氧乙酸（2，4－D） 2 萘乙酸（NAA） 3 吲哚乙酸（IAA） 4 吲哚－－3－丁酸（IBA） NAA、IAA、IBA被广泛用于生根，2，4－D有利于愈伤组织的诱导和生长。 IAA容易光解，注意用棕色试剂瓶保存，保存时间不要太久。 溶解方法：1M NaOH或95％酒精，以前者为好保存：配成一定浓度后，冰箱冷藏保存 2、细胞分裂素 自然界中，细胞分裂素影响细胞分裂，顶端优势的变化和茎的分化等