张易祥_微生物遗传训魔实验.pptVIP

实验八 微生物遗传实验;一 实验目的;二 实验原理;2）微生物的抗药性突变是DNA分子的某一特定位置的结构改变所致，与药物的存在无关，某种药物的存在只是作为分离某种抗药性菌株的一种手段，而不是引发突变的诱导物。 3）因而在含有一定抑制生长药物浓度的平板上涂布大量的细胞群体，极个别抗性突变的细胞会在平板上生成菌落。;4）将这些菌落挑取纯化，进一步进行抗性试验，就可以得到所需要的抗药性菌株。 5）抗药性突变常用作遗传标记，因而掌握分离抗药性突变株的方法是非常重要的。 6）为了便于选择适当的药物浓度，分离抗药性突变株常用梯度平板法。本实验用梯度平板法分离大肠杆菌抗氨苄青霉素突变株。 ;2、紫外线诱发突变 紫外线是一种常用的物理诱变因素，主要作用于DNA，引起DNA损伤； 为避免光修复，处理后的微生物应放暗处培养。 ;三 实验步骤 ;（2）待平板??的培养基凝固后将平皿放平，再倒入含有链霉素的上层培养基10mL（含有链霉素200u/mL：现配现用，原液20万单位，吸50微升加入50 ML培养基）；2个组做，8个组用。 (在超净工作台做) 在皿底用箭头标记,示药物浓度从低到高。 注意：抗生素要在培养基冷却到50度左右再加； ;（3）取一支大肠杆菌液体培养物，用移液枪移取200微升菌液到梯度平板上，进行涂布。（实验室做） （4）将平板倒置于37℃培养2天；观察经一次培养的梯度平板上大肠杆菌的生长情况。 ;后续实验（不做）;2、紫外线诱变枯草杆菌（在实验室做）;思考题： 1、梯度平板中部的单个菌落被划线，并二次培养的目的是什么？ 2、如果要计算紫外线诱变的致死率，该如何设计实验？