第一章 基因与基因沟膜程.pptVIP

第一章 基因与基因工程;第一节 基因与基因工程的概念;T4噬菌体-E.coli的病毒 感染后30反应min-快速溶菌- T4 phage rⅡ区编码 rⅡ区可分为rⅡA 和rⅡB两个亚区，分别产生一种特殊物质，同时存在时，使大肠杆菌K菌株溶菌裂解 ;不同基因间的突变型在互补试验中，不论是顺式还是反式排列均表现互补效应；但如果是属于同一基因的不同位点的突变，则顺式构型表现互补，反式构型则不能互补。 Benzer将这样一个不同突变之间没有互补的功能区称为顺反子（cistron）。一个顺反子就是一个功能水平上的基因。（现在常用顺反子作为基因的同义词） 一个顺反子就是一段核苷酸序列，或者说是相当于一个基因的DNA或RNA单元，它编码一种完整的多肽链。（顺反子是功能单位） 最小交换单位（交换子）和最小突变单位（突变子）－－DNA分子中的一个核苷酸;顺反子（cistron）： 每一个顺反子就是一段核苷酸序列，或者说是相当于一个基因的DNA或RNA单元，它编码一种完整的多肽链。 顺反子是功能单位，它是由许多可以突变的位点组成的，而这些位点之间又可以发生交换 现在大约分析了2400个rⅡ区的突变，已鉴定了304个不同的突变位点 根据Benzer的计算，在功能DNA中，最小交换单位约为1-3个核苷酸对，这同理论上的最低值一个核苷酸对极为接近。 所以，顺反子中的最小交换单位（交换子）和最小突变单位（突变子），都应是DNA分子中的一个核苷酸对。;二、基因的分子定义;三、基因工程的概念;各种来源的遗传物质　 +　载体系统 　　　 复制子 ;第二节、基因研究的发展;二、基因与DNA分子;Neither heat-killed S-type nor live R-type bacteria can kill mice, but simultaneous injection of both can kill mice just as effectively as the live S-type.;The DNA of S-type bacteria can transform R-type bacteria into the same S-type.;1952年，美国冷泉港卡内基遗传学实验室 A.D.Hershery M.Chase 肯定了Avery的结论;The genetic material of phage T2 is DNA ;1953年，英国科学家弗朗西斯·克里克(F.Crick)与美国科学家詹姆士·沃森(J.Watson)在英国剑桥的一家实验室合作，揭示了ＤＮＡ的基本结构为双螺旋结构，为后来科学家解开遗传基因密码，绘制生命蓝图，搭建了一个出发的平台。从这个平台出发，科学家们研究出基因疗法、转基因作物、生物克隆技术和ＤＮＡ鉴定技术，掀起了一场将从各方面改变人类生活的生物技术革命。 ;Watson 和Crick发表了DNA双螺旋模型之后不久，于同年又紧接着发表了DNA半保留复制模型，这一建立在碱基互补基础上的机制为转录、修复、重组、分子杂交等奠定了基础。 Watson 和Crick认为：DNA自我复制时亲本链保持不变，但双链分成两半，每个亲本链作为复制的模板，子代双链含有一条亲本链和一条新合成的链。这就是DNA复制的半保留模型（semiconservative replication model）。 双螺旋模型中存在最大的问题是双链是如何打开的？其所需的能量从何而来？ ;半保复制的验证 -Meselson-Stahl实验 ;1958年Meselson,M.和Stahl,F.W.采用重同位素15N作DNA标记，而不用放射性同位素32P和14C。15N 会导致DNA分子密度显著增加，这样可以通过密度梯度离心将亲本链和子代链区分开来。 大肠杆菌在含15N的培养基中生长，所以它们的DNA被广泛标记上重同位素(重链)。然后细胞被转移到含正常14N的培养基中，DNA从经过一到两轮复制的细胞中分离出来。DNA用浮力密度离心分析，分辨重链DNA，正常的轻链DNA和包含一条重链和一条轻链的DNA“杂种链”。在一轮复制之后，DNA都是在“杂种链”的密度中，而在两轮复制后，有等量的“杂种链”和轻链密度。这些结果只与半保留复制模型相符。全保留模型可以排除，但分散模型却不能排除（图11-2）。 Meselson等还做了第二项实验，就是将第一代的14N/ 15N杂种链变性使双链分开，然后再将变性前后的双链和单链分别进行CsCl密度梯度离心。变性前杂种双链只有一种带，密度为1.717克/厘米3，变性后两条单链的密度不同，因而呈现了两条带，一条为15N带，（1.740克/厘米3），另一条为14N带（1.725克/厘米3）。而同时进行作对照的样品是从肺炎球菌（D. pn