贮存条件及其稳定性.PDFVIP

目录 产品简介 2 原理 2 贮存条件及其稳定性 2 产品组分 3 使用前请注意 3 匀浆化组织或细胞 3 A. 液氮法 3 B. 转子-定子式匀浆器法 3 C.注射器方法 3 RNA 提取操作步骤 4 A.真核细胞和组织RNA 提取步骤. 4 B. 细菌RNA 提取步骤 4 C.植物和真菌RNA 提取步骤 6 DNA 污染 7 RNA 的量化和保存 7 RNA 质量 7 常见疑难问题 8 Biozol RNA 提取试剂 Page 1 产品简介 Biozol 可从各种真核培养细胞，动物组织，细菌植物和真菌中快速高效提取总 6 RNA ，整个实验可控制在30分钟内。通常情况下可单次处理1 x 10 个真核细 胞，1 x 109 个细菌细胞，100 mg 动物或植物组织。如果你要进行全血RNA提取 的话，可以使用本试剂盒，不过我们建议使用EzgeneTM Blood RNA Kit (product # R6411)这个专门设计来用于全血RNA提取的试剂盒，EzgeneTM Blood RNA Kit 可以很好的溶血，并去除血红素，提高RNA 的得率。 本试剂盒纯化的RNA可用于RT-PCR, Northern 杂交，mRNA纯化，体外翻译等 下游实验。 原理 细胞或组织经Biozol裂解，试剂中的成分会抑制RNase活性。加入氯仿抽提，裂 解液将分为水相和有机相。RNA存在于水相中，用异丙醇处理水相后,经过75% 酒精的洗涤，室温晾干或真空干燥后用DEPC水洗脱就能得到高质量的RNA 。 贮存条件及其稳定性 Biozol 试剂保存于4 ℃。该产品可保证在购买之日起至少24 个月內有效。 Page 2 Biozol RNA 提取试剂 产品组分 Catalog # R1020-00 R 1020-0 1 R 1020-02 Biozol 溶液 10mL 100 mL 100 mL x 5 说明书 1 1 1 注：Biozol 溶液包含异硫氰酸胍和苯酚，实验时请格外小心。 即日起为方便客户使用，Biozol溶液改为红色。 操作前请注意 仔细阅读说明书，熟悉相关步骤，并准备好相关器材。  实验时，戴好一次性手套减少RNase污染，使用一次性的RNase-free 枪头。 实验操作尽量小心快速。  实验前要确定使用的样品量，最大用量是100 mg ，一些富含RNA 的组织， 我们建议使用30 mg 的样品。如果一些RNA含量佷少的样品，那么样品使 用量增大为100 mg 。 组织匀浆 A. 液氮研磨 液氮研磨组织并立即置于液氮中冷冻，液氮下将组织研磨成细粉，将悬浮的粉 末倒入预冷的离心管中，注意预先冷却离心管，否则样品倒入时，液氮沸腾会 损失样品。在样品融化