大学微生物复习生长和环境条件.pptVIP

第 五 章 微生物的生长和环境条件 第 一 节微 生 物 的 个体与群体生 长 微生物生长：是指细胞物质有规律地、不可逆增加的生物过程。 微生物繁殖：是微生物生长到一定阶段由于细胞内各种细胞结构的复杂和重建导致产生新的生命个体，即引起生命个体数量增加的整个生物学过程。 一. 微 生 物 的 个体生 长 细菌的拟核DNA的复制与分离 二、细菌纯培养生长曲线 是将某种单细胞微生物少量接种到恒定容积的液体培养基中培养，定时取样分析。以菌数的对数为纵坐标，生长时间为横坐标作图而的达到的曲线。 细菌纯培养生长曲线图 1.延迟期 (Lag phase） 特点： （1）.细菌数量不增加或增加很少，代谢活跃； （ 2）细胞内RNA，尤其是rRNA的含量很高，细胞的嗜碱性强； （ 3）细胞体积增大，拉长； （ 4）细胞内的代谢活力强，特别是合成一些必需的酶类； （ 5）抗性有所降低，对不良环境因素表现很敏感。 细胞的最初个数和生长一段时间后个数之间关系： N = N 0 · 2 n 式中： N ＝ 细胞最终数目 , N 0 ＝ 细胞初始数目 , n = 指数生长期细胞繁殖代数。 细胞生长的代时G: G ＝ t / n t=指数生长期时间: t = t 2 —t 1 繁殖代数n的计算: N = N 0 · 2 n lg N = lg N 0 + n log2 lg N － lg N 0 = n log2 ? n = (lg N － lg N 0)/ lg2 = (lg N － lg N 0 )/ 0.301 = (lg N / N 0 )/ 0.301 G ＝ t / n ＝( t 2 —t 1)/ (lg N / N 0 )/ 0.301 单位时间内细胞分裂次数(R) : R=n/ ( t 2 —t 1) =1/G 2.对数期（Log phase）特点 （ 1）代时最短，生长速度最快； （ 2）细胞稳定（平衡）生长：细胞内各种物质按比例生长，菌体成分均匀； （ 3）酶活性高，代谢稳定，菌体大小基本一致。 3.稳定期（Stationary phase） 特点： （ 1）新生=死亡，达到动态平衡，生长速度为零 ； （ 2）活菌数的总量达到最大值； （ 3）胞内的储藏物开始形成（如肝糖粒、脂肪粒等）； （ 4）某些芽孢菌的芽孢开始形成； （ 5）某些细菌过量积累次级代谢产物，如抗生素、维生素等。 4.死亡期 （Death phase） 特点： （ 1）生长速率负增长； （ 2）细胞形态多样，出现畸形，形成衰退型； （ 3）蛋白水解酶活跃，出现细胞自溶现象； （ 4）芽孢细菌芽孢大量释放。 第二节 微生物的培养与生长量的测定 一、纯培养技术 纯培养：微生物学中将在实验室条件下从一个细胞或一种细胞群繁殖得到的后代称为纯培养 获得纯培养的技术 稀释平板分离法 原理同稀释平板计数 平皿划线分离法 以沾有微生物的接种环在固体平板上不断划线以稀释接种环上微生物数量，最终可在划线处使微生物以单细胞表达式分开。经培养后形成单菌落。 富集培养 用选择性培养基及培养条件，使被研究的微生物在培养物中的数量由少数转化成多数。 用于样品中数量占少数的微生物，或研究难以分离纯化的微生物。 二元培养：是纯培养的一种特殊形式，主要用于分离寄生微生物的方法。 如噬菌体和细菌的培养物。 共培养(Coculture) 用于培养一些在生长代谢过程中紧密相互依赖的微生物。 如厌氧条件下丁酸的降解： 丁酸 乙酸+氢 （丁酸降解菌） 氢+CO2 甲烷 （产甲烷菌） 例：丁酸盐降解菌群的富集与分离 厌氧条件下： 丁酸 甲烷+CO2 丁酸 乙酸+氢 （丁酸降解菌） 乙酸 甲烷+CO2 （产甲丝烷菌） 氢+CO2 甲烷 （产甲螺烷菌） 富集培养基： 丁酸钠 30mM 硫化钠 0.016 Na2CO3 0.08 半胱氨酸 0.5 酵母膏 1.0 K2HPO4 0.5 MgSO4.6H2O 0.33 NH4Cl 0.4 CaCl2 0.05 刃天青 0.002 微量元素 分批培养的特点 微生物培养时间不同其生长状态不同 培养时间较短 容易控制无菌条件 能保证菌种的最小变异 适合于