输血相关感染标志物检测方法的确认灵敏度及特异性实验标本的保存 .pptVIP

《血站技术操作规程-血液检测》 —关键技术要点的理解 江苏省血液中心 黄成垠 　 血液检测-内容概况 4.1 可经输血传播感染的检测项目及检测方法 4.2 血液检测试剂 4.3 仪器设备使用要求 4.4 实验室信息管理系统 4.5 血液检测标本 4.6 试验操作 4.7 试验性能监控 4.8 试验结果的判定 4.9 ELISA初次试验有反应性标本的重复试验 4.10 核酸初次试验有反应性的进一步处理 4.11 血型检测 4.12 血液检测结论的判定 4.13 血液检测结论的报告和利用 　 血液检测-内容概况 资料性附录 附录B 血液检测方法的确认 附录D 血液检测室内质控方法 附录E 微板法ABO血型定型试验 　 血液检测-参考标准 《血站管理办法》 《血站质量管理规范》 《血站实验室质量管理规范》 WHO献血者输血传染病筛查建议(2009) WHO采供血机构GMP指南 　 血液检测-主要变化 血液检测部分与献血前的快速检测部分分开，仅针对采集后的全血和成分血检测提出管理和技术要求。 血液检测部分包含了检测前中后的过程控制要求。 明确了标本采集、保存、运输、交接等环节的控制要求； 明确了输血相关感染检测的方法和程序； 增加HIV抗原检测选择； 增加HCV抗原检测选择； 增加NAT检测程序； 增加血型自动化检测方法选择要求； 删除TP非特异性试验方法； 删除ALT快速法。 将设备、试剂、LIS的部分管理要求细化，纳入规程。 　检测标本的采集运输 标本留取:必需从采血袋留取. 标本管的选择：常规血清学检测：真空采血管，抗凝剂的选择（建议为EDTAK2）？NAT采用无RNA酶、无DNA酶的带惰性分离胶的EDTAK2真空采血管。 标本运输: 2～10℃冷链，运输时间2小时以上的应记录箱内温度。 标本保存：留取2年的标本为血辫标本，检测后的标本无需长期保存。核酸标本不需保存（血站核酸检测质量保证指南）。血辫长度至少20cm(建议）。 　血液检测策略 检测策略： HIV、HCV、HBV采用2遍EIA检测或采用1遍EIA、1遍NAT检测均符合规程要求。但HCV仍有争论。 理论上讲：4代抗HIV和NAT的组合与3代抗HIV和NAT的组合模式，其检测效率相同。 ALT采用2种方法（干化学法和速率法）进行2次检测，分别在采血前和采血后进行。我的理解是采用的检测方法，其性能指标应接近。 　检测试剂的管理 血液检测试剂 试剂的进货检查验收、隔离存放（4.2.3和4.2.4条款） 试剂的质量抽检（4.2.5条款） 审核批准（4.2.6条款） 试剂保存和质量监控（4.2.7条款） 进货验收与放行记录 建议质量抽检由检验科负责 献血前的初筛试剂，特别是ALT、HBsAg金标试剂条也要纳入质量抽检的范围。 仪器设备的使用要求 新或大修设备的确认：安装确认、运行确认和性能确认。计量检定或校准。 多台设备检测同一个项目，设备之间的比对 自动化检测设备与手工操作的比对。手工操作的记录。 ＥＩＡ检测的判定规则 ２遍ＥＩＡ检测的判定规则 　 　　　２遍ＥＩＡ检测的判定规则 １遍ＥＩＡ、１遍ＮＡＴ的判定规则 　 　　　　献血者样本1次ELISA、1次 NAT检测策略 血型检测 血型检测（4.11条款） 血型检测项目 GB18469《全血及成分血质量要求》规定的强制检测项目有：1) ABO血型正确定型；2）RhD血型正确定型。 (4.11.1条款） 应当经过2次检测结果的比对，一致时才能做出血型检测最终结论。（ 4.11.3.1条款） 如果2次检测结果不一致，应当进行细致审慎调查，发现导致不一致的原因，正确无误加以解决。（ 4.11.3.2条款） 献血前1次正定型，血液检测1次正定型、1次反定型。 血液检测方法的确认 需确认的对象: 实验室首次引入的检测方法，如实验室从未使用过的试剂、仪器等。 实验室首次将某项目引入现用检测方法，如HBsAg项目由A仪器检测改为由B仪器检测。 若多台仪器（相同品牌和型号）检测同一个项目，应对每一台仪器的性能进行确认比较。 检测方法包含检测试剂及耗材，检测仪器。可以理解为用实验室现用的试剂对新购仪器性能的验证；或用现用仪器对新试剂的验证；用同一试剂对多台仪器的比对或仪器操作和手工操作的比对。 输血相关感染标志物检测方法的确认 确认前的准备工作 确认前的一般要求：见规程B.3.1条款 建议如下： 首先确认说明书上标明的性能指标是否满足规程要求；您的实验室条件是否满足方法的要求。 ELISA检测试剂：批内﹤CV15%