miRNA芯片-华联生物芯片服务2014.pdfVIP

2014/ May 华联生物科技 1 1993年，miRNA 领域的 开拓者 Ambros 教授在线 虫中发现了第一个 miRNA ， lin-4. 2001年 Ambros 实验室 与 Bartel 和 Tuschl 实验 室在 《Science》杂志上同时 发表了 miRNA 论文，发现了 一系列miRNA ，从此 miRNA 研究在全球如火如荼地开展 起来 。 TheC.elegans heterochronic gene lin-4 encodes small RNAs with antisense complementarity to lin- Breakthrough discoveries in miRNA biology with a special focus on the cardiovascular field 2011, 108:219-234 Circulation Research MicroRNAs （mRNA-interfering complementary RNA ） 来源 ： 真核生物中发现 ，内源性的 ，具有调控功能的非编码RNA ，大 小长约 20~25个核苷酸 ，经过一系列加工得到成熟的 miRNAs 作用方式 ：通过碱基互补配对的方式识别靶 mRNA或 DNA 作用结果 ：主要调节基因的表达，发育，增殖，分化和凋亡 版本更新 ：当前的Sanger miRBase Release 已升级为20.0 ，包含有 206 物种，24,521个发夹 序列和 30,424 成熟序列。 • 21 – 25 nt, intrinsic , non-coding small RNA • locate in intron/ exon • Sanger miRBase • 5’ and 3’ mature miRNA (5p 3p) • Highly conservation • family/ cluster miRNA通常存在于基因的内含子区域〃miRNA的合成先后在细 胞核和细胞质中进行〃 细胞核中的miRNA基因首先在RNA聚合酶Ⅱ的作用下转录出初 级 miRNA( pri-miRNA) 被RNA聚合酶Ⅲ( Drosha酶)及其协同因子(DGCR8)组成的酶复 合，体剪切为具有茎环结构的miRNA前体(pre-miRNA) 随后被转运蛋白5( exportin-5 ，Expt 〃5)识别并结合，依赖 一种小GTP结合蛋白( ran-GTP)将其转运至细胞质 在胞质中，pre-miRNA 被同属RNA酶Ⅲ家族的Dicer酶， 在TRBP ( Tar RNAbinding proteins) 和 AGO2( Argonaute 2) 的协助下处理成长度约22nt的双链 RNA(miRNA : miRNA 〃 在解旋酶的作用下，其中1条链(miRNA*)很快被降解，