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微小 RNA在心血管疾病中探究进展【摘要】 微小RNA（microRNA ）是一类高度保守的非编码小RNA。它通过降解miRNA或抑制蛋白质翻译而调控基因的表达。最新研究表明，microRNA 在心血管病理、生理过程中起者十分重要的调控作用。它参与了心脏发育、心脏重构、心律失常、血管病变等过程。现就microRNA的生物发生、作用机制及其在心肌肥厚、心力衰竭、心肌损伤、凋亡、心律失常、血管病变中相关作用的研究进展作一综述。 【关键词】 microRNA；心肌肥厚；心肌损伤；凋亡；心律失常 microRNA（miRNA）是一类在生物进化过程中高度保守的非编码小分子 RNA，通过识别靶基因mRNA分子3＇末端翻译区域特异性结合, 负性调控靶mRNA翻译，是一类非常重要的转录后调控因子，在心血管疾病发生发展过程中起到十分重要的调控作用。近年来在研究miRNA在心肌肥厚、心力衰竭、心肌损伤、凋亡、心律失常、血管病变等疾病的作用机制方面取得了一系列进展，使其成为国际心血管研究领域的热点。 1 microRNA生成及其作用机制 1.1 microRNA生成 1993年Lee等在秀丽新小杆线虫(Cae2norhabditis elegans )中发现了第一个 miRNA,并命名为lin-4。2000年Reinhart等在对线虫发育调控研究中发现了let-7,从而拉开了miRNA研究的序幕。在细胞核内编码miRNA的基因通过RNA聚合酶Ⅱ的作用转录生成 miRNA的原始转录产物pri-miRNA , pri-miRNA在双链RNA特异的核酸酶-Drosha酶的作用下, 被剪切为长约 70-90个核苷酸长度具有发夹型结构的前体miRNA( pre-miRNA )。pre-miRNA在 Ran-GTP 和转运蛋白 Exportin 5的协同作用下转运到胞浆中，并在Dicer酶的作用下被剪切成 21-25个核苷酸的双链mi-RNA。随后双链解旋, 其中一条链被降解，另一条则成为成熟miRNA。成熟miRNA以不对称方式整合入RNA诱导的基因沉默复合物（RISC）后形成miRNA复合物（miRISC）。如果miRNA与靶mRNA互补配对后则该复合物降解靶mRNA。若miRNA与靶mRNA不完全互补，则起到封闭mRNA的作用，抑制其翻译过程。 1.2 microRNA作用机制 研究表明人类基因组中约有30%基因受miRNA调控，miRNA具有广泛的基因调节功能。每个miRNA可以有多个靶基因 ,而几个 miRNAs也可以调节同一个基因。这种复杂调节网络既可以通过一个miRNA来调控多个基因的表达，也可以通过几个miRNAs的组合来精细调控某个基因的表达，提示miRNA可能通过多元化途径调控靶基因表达。microRNA之间还可能存在协同、拮抗等相互作用，从而表现出microRNA功能作用多样性。但是在不同的组织中，都有特异的miRNA占主导地位。 2 microRNA检测方法 目前miRNA常用检测方法有：（1）Northern blotting 法：是经典的探针杂交检测法，但特异性和灵敏度不高，只能检测表达量非常大的microRNAs而且不能定量检测，为此发展了用锁核酸(LNA)修饰的杂交探针来取代传统DNA探针技术,使Northern blotting法的检测灵敏度和特异性得到显著改善；（2）实时荧光定量 PCR法(Real-time PCR)：用于基因表达的定量和用 DNA阵列技术检测证实基因的差异表达。具有敏感性高、可定量检测样本，需要量少等优点；（3）微阵列芯片技术(Microarray)：能够同时测定多个样本, 可以实现 miRNA 的高通量分析, 即在一块芯片上同时固定多个与miRNA序列互补的探针, 然后加入经过标记的样本RNA, 杂交后进行信号检测，但需要用其它方法对其结果进行检验。 3 microRNA与心血管疾病 越来越多研究发现 miRNA在生物发育过程中存在组织特异性表达, 参与形成并维持组织特异性。先后有数十种miRNA在心肌细胞中被鉴定，例如miRNA-1、miRNA-133a、miRNA-133b、miRNA-195等，它们在心血管系统疾病发生发展过程中起着非常重要的作用。 3.1 microRNA与心肌肥厚及心力衰竭 miRNA是心肌细胞异常增殖生的潜在抑制物或加速剂。特定miRNA表达上调, 抑制心肌细胞异常增殖从而阻止或延缓心脏重构的进程；表达下调, 促进心肌细胞异常增殖, 加速心脏重构。目前已经明确心肌细胞肥大中发挥作用的miRNA主要有miRNA-1、miRNA-133、 miRNA-208、miRNA-195、miRNA-21。 miRNA-20