通过组织培养快速繁殖芦荟.docxVIP

芦荟的组织培养学生姓名：　郭胜敏学　　号：20100455038专　　业：　林学10 　日期： 2012.12.1 目录1引言……………………………………………………………………………………12方法……………………………………………………………………………………12.1材料与培养基………………………………………………………………………12.1.1材料的选择………………………………………………………………………12.1.2培养基的选择与配制……………………………………………………………22.1.3植物生长调节剂的使用…………………………………………………………22.2愈伤组织培养………………………………………………………………………22.3继代培养……………………………………………………………………………32.4分化培养……………………………………………………………………………32.5生根培养及苗床假植………………………………………………………………32.6炼苗…………………………………………………………………………………32.7移栽…………………………………………………………………………………32.8脱水…………………………………………………………………………………32.9栽植…………………………………………………………………………………3参考文献………………………………………………………………………………4芦荟组织培养与快速繁殖技术研究1.引言近年来，由于芦荟化学及药理学研究的深入，现已形成了一股世界性的芦荟保健热，从而就带动了我国芦荟栽培产业的发展。现在，芦荟的栽培产业也已开始在我国兴起，但由于芦荟不能自花授粉结实(虽然能开花，但大多数栽培种的芦荟花粉是不孕的，不易产生种子)。因此，用种子繁殖非常困难。目前的繁殖方法主要是分株与分蘖，但难以快速、大量地繁殖种苗，难以满足当今芦荟种植业对种苗的需求。这也是当前芦荟种苗昂贵的重要原因之一。用植物组织培养方法可在短期内繁殖大量规格划一、种性稳定的种苗，具有成本低、效益高的特点。2.方法2.1材料与培养基材料为l0~l5cm高的芦荟幼苗愈伤组织诱导培养基为MS+(1~6mg/ L)BA+(0.1~0.5mg/L)NAA分化培养基为MS+(2~4mg/L)BA+ (0.1~0.5mg/L)NAA生根培养基为MS+(0.1~0.5mg/L)IBA+(2~5mg/L)PP332.1.1材料的选择用芦荟的叶片、茎秆等作为外植体进行组织培养，很难获得成功，因为其分泌的黏液含有较高的多酚氧化酶，其活性使试验材料很快会褐化，甚至变黑；应从健壮生长的芦荟成年植株上摘取侧生嫩芽，取芽时最好用手将芽从母株上掰下，不用剪刀等工具切割，因为掰下的芽在培养时分泌产生相对较少的酚类化合物，对以后培养过程中防止褐化有所帮助，而切割的芽容易产生过多的酚类化合物，在以后的培养过程中易发生褐化。2.1.2培养基的选择与配制培养基是活体植物组织体外保存、生长发育的营养来源。不同的植物都有自己最适合的组培培养基。多数学者认为，MS培养基适宜芦荟芽的分化与增殖培养。潘学峰等筛选古巴芦荟侧芽分化的最佳培养基时发现，MS培养基诱导出的侧芽数最多，是芦荟外植体侧芽分化最理想的培养基；其次是H培养基，较差的是KC培养基。以MS培养基为例，其组成是在配制1升（1000毫升）培养基时，加硝酸铵1.65克、硝酸钾1.9克、氯化钙0.44克、硫酸镁0.37克、磷酸二氢钾0.17克、碘化钾0.83毫克、硼酸5.2毫克、硫酸镁22.3毫克、硫酸锌3.6毫克、钼酸钠0.25毫克、硫酸铜0.025毫克、氯化钴0.025毫克、硫酸铁27.8毫克、蔗糖30克与琼脂7克。其他生长调节物质要根据花卉的种类与培养目的而确定。大量元素浓度高时有利于发展茎叶，而较低时有利于生根，MS培养基中大量元素浓度过高，为此常采用1/2、1/4大量元素浓度作培养用，仅用很低的细胞分裂素，并加入适量的生长素，用的最普遍的是NAA，这样生长效果较好。2.1.3植物生长调节剂的使用在芦荟组织培养中，使用的生长素类有IBA与NAA，细胞分裂素较多是是6-BA，ZT与KT使用较少。生长素类物质与细胞分裂素类物质搭配使用对芽的分化与增殖效果较好，而生根培养多数单独使用IBA或NAA。在促进侧芽产生时往往使用较高浓度的细胞分裂素，在一定浓度范围内，如使用较高浓度是6-BA可明显促进侧芽产生，随着6-BA浓度的声高，分化的芽也随之增加。但是，6-BA在培养过程中存在一定程度的累积效应，过高浓度的细胞分裂素会抑制新芽的发生与生长，且导致培养材料变异的机率增大。适宜浓度的IBA比NAA更有利于芽的分化与增殖，有实验表明：在相同的6-BA浓度下，IBA作用比NAA更有效，增殖率较