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目录
简介……………………………………………………………………………………………………… 9第一章疏水相互作用层析的原理 ……………………………………………………………………12理论情况下的疏水相互作用层析 ……………………………………………………………………12水的作用 ………………………………………………………………………………………………12蛋白结构 ………………………………………………………………………………………………13可逆的相互作用 ………………………………………………………………………………………14疏水相互作用分离的步骤 ……………………………………………………………………………14分辨率 …………………………………………………………………………………………………17柱效 ……………………………………………………………………………………………………18选择性 …………………………………………………………………………………………………19第二章疏水相互作用的实践 …………………………………………………………………………25简介 ……………………………………………………………………………………………………25纯化策略( CIPP)中的疏水相互作用层析 …………………………………………………………25疏水相互作用分离的实际考虑 ………………………………………………………………………27筛选选择性 ……………………………………………………………………………………………30自动的疏水相互作用填料筛选,方法开发和优化 …………………………………………………30手动介质筛选,方法开发和优化 ……………………………………………………………………31样品性质和配基的选择 ………………………………………………………………………………33盐的选择和缓冲液制备 ………………………………………………………………………………33柱子和填料准备 ………………………………………………………………………………………38样品制备 ………………………………………………………………………………………………38样品上样 ………………………………………………………………………………………………39样品上样量 ……………………………………………………………………………………………39样品体积 ………………………………………………………………………………………………40温度 ……………………………………………………………………………………………………40洗脱 ……………………………………………………………………………………………………41线性梯度洗脱 …………………………………………………………………………………………41逐步洗脱 ………………………………………………………………………………………………42流速 ……………………………………………………………………………………………………35流速控制 ………………………………………………………………………………………………44洗涤和再平衡 …………………………………………………………………………………………45分析结果和下一步 ……………………………………………………………………………………45规模化放大 ……………………………………………………………………………………………46仪器选择 ………………………………………………………………………………………………46
疏水相互作用层析介质的保养 ………………………………………………………………………47问题解决 ………………………………………………………………………………………………47理想的疏水相互作用分离:目的蛋白可以用梯度洗脱很好的分离 ………………………………47目的
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