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实验4、重金属污染对植物叶绿素含量
实验四、重金属污染对植物叶绿素含量的影响 实验目的 掌握叶绿素含量的测定 了解重金属污染对叶绿素含量的影响 了解叶绿素含量在重金属胁迫条件下的变化趋势 实验原理 高等植物叶绿素分叶绿素a和叶绿素b，其含量的高低是反映植物光合作用能力的一个重要指标。叶绿素含量的变化可以反映污染对植物光合作用的影响。 实验仪器与材料 仪器：带盖离心管（5ml）、分光光度计、离心机等； 材料：小麦、苏丹草、狼尾草、玉米、黄瓜、莫斯科玉米草等； 试剂：丙酮水（80%） 、CuSO4、重铬酸钾（Cr6+）系列溶液（0、10、25、30、50mg/L） 实验步骤： 实验材料培养： 将大小比例均匀的种子用蒸馏水浸泡、吸胀后，移入铺有2层滤纸的培养皿中，置入光照培养箱中培养（22～25℃）。 分组染毒处理 在种子长出2片真叶后，标记培养皿，分别用5个不同浓度的重金属溶液处理。每组3个平行处理。每天用蒸馏水冲洗1次，再用原组相应浓度的重金属溶液培养。各种材料培养1周后，即可进行叶绿素有提取分析。 叶片中叶绿素提取 精确称取新鲜植物叶片0.1g，尽量剪碎，放入研钵中，加入少量石英砂研成糊状，用80%的丙酮水分批提取，将丙酮提取液过滤后定容至4ml。 精确称取新鲜植物叶片0.1g，尽量剪碎，放入5ml的离心管中，加入80%丙酮水2ml，超声提取30min，浸提12～24h（其间每隔3小时摇动30min），再加入2ml丙酮水，离心（4000转、10min），吸取上清液，定容至5ml～10ml，备用。（尽量避免光照，以免叶绿素受光分解）。 测定吸光度 在波长分别为663nm、645nm条件下测定提取液的吸光度。如果浓度较高，适当稀释后比色定量。 计算叶绿素含量 叶绿素a和b及总叶绿素的浓度分别为： Ca、Cb和CT，可根据下式计算： Ca=12.7A663-2.69A645 Cb=22.9A645-4.68A663 CT=8.02A663+20.21A645 式中：A663、A645分别为提取液在波长663nm、645nm下的吸光度。 数据处理与实验结果分析： 每个处理组的平行测定结果用平均数±标准误（￣ ±SE）表示，以SPSS统计软件One-Way ANOVA，分析不同处理间的差异性。可Excel做图，展示实验结果并分析。 --The END-- * * 分组染毒处理 实验材料培养 各处理组叶片中叶绿素提取 测定吸光度 计算叶绿素含量 统计分析各处理组的差异性 X *
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