以蛋白质工程为例得蛋白质研究与进展分析.docVIP

以蛋白质工程为例的蛋白质研究与进展分析 为期十周的生物资源化学课程马上就结课了，短短的十周里，我真的有所学，有所收获。选择这门课，首先是出于对生物和化学的兴趣；其次则是：大一选修了肖志东老师的《化学研究与进展》。这两门课有很大的联系，因此大二接着选修了相关的课程。这门课，对于我这样一个经管院的文科生来说，具有一定挑战性。所以论文就从自己了解的更多的方面—蛋白质，阐述我的观点。 本文大致结构如下：蛋白质的定义及概述，蛋白质研究与进展(以蛋白质工程为例)，小结。 1 蛋白质定义及概述 1.1 蛋白质定义 化学课本上对于蛋白质：α—氨基酸按一定顺序结合形成一条多肽链，再由一条或一条以上的多肽链按照其特定方式结合合而成的高分子化合物。 蛋白质是一种复杂的有机化合物。氨基酸是组成蛋白质的基本单位，氨基酸通过脱水缩合连成肽链。蛋白质是由一条或多条多肽链组成的生物大分子，每一条多肽链有二十至数百个氨基酸残基（-R）不等；各种氨基酸残基按一定的顺序排列。蛋白质的氨基酸序列是由对应基因所编码。除了遗传密码所编码的20种基本氨基酸，在蛋白质中，某些氨基酸残基还可以被翻译后修饰而发生化学结构的变化，从而对蛋白质进行激活或调控。多个蛋白质可以一起，往往是通过结合在一起形成稳定的蛋白质复合物，折叠或螺旋构成一定的空间结构，从而发挥某一特定功能。合成多肽的细胞器是细胞质中糙面型内质网上的核糖体。　　 食入的蛋白质在体内经过消化被水解成氨基酸被吸收后，重新合成人体所需蛋白质，同时新的蛋白质又在不断代谢与分解，时刻处于动态平衡中。因此，食物蛋白质的质和量、各种氨基酸的比例，关系到人体蛋白质合成的量，尤其是青少年的生长发育、孕产妇的优生优育、老年人的健康长寿，都与膳食中蛋白质的量有着密切的关系。 蛋白质是由C（碳）、H（氢）、O（氧）、N（氮）组成，一般蛋白质可能还会含有P、S、Fe（铁）、Zn（锌）、Cu（铜）、B（硼）、Mn(锰)、I（碘）、Mo（钼）等　这些元素在蛋白质中的组成百分比约为：碳 50% 氢7% 氧23% 氮16% 硫0~3% 其他 微量 蛋白质的性质 ①具有两性在蛋白质分子中存在着氨基和羧基，因此跟氨基酸相似，蛋白质也是两性物质。　 　 ②可发生水解反应蛋白质在酸、碱或酶的作用下发生水解反应，经过多肽，最后得到多种α-氨基酸蛋白质水解时，应找准结构中键的“断裂点”，水解时肽键部分或全部断裂　　 ③溶水具有胶体的性质有些蛋白质能够溶解在水里（例如鸡蛋白能溶解在水里）形成溶液。蛋白质的分子直径达到了胶体微粒的大小，所以蛋白质具有胶体的性质。　 ④加入电解质可产生盐析作用少量的盐（如硫酸铵、硫酸钠等）能促进蛋白质的溶解。盐析是个可逆过程利用这个性质，采用分段盐析方法可以分离提纯蛋白质　　⑤蛋白质的变性在热、酸、碱、重金属盐、紫外线等作作用下，蛋白质会发生性质上的改变而凝结起来这种凝结是不可逆的蛋白质变性后，失去了它们生理上的作用 ⑥颜色反应蛋白质可以跟许多试剂发生颜色反应　　 ⑦蛋白质在灼烧分解时，可以产生一种烧焦羽毛的特殊气味利用这一性质可以鉴别蛋白质 主要内容 根据需要合成具有特定aa序列和空间结构的蛋白质； 确定蛋白质化学组成、空间结构与生物功能之间的关系。 实现从aa序列预测蛋白质的空间结构和生物功能，设计合成具有特定生物功能的全新的蛋白质。 人类需要 蛋白质工程是以蛋白质结构功能关系的知识为基础，根据需要对负责编码某种蛋白质的基因进行重新设计，使合成出来的蛋白质的结构，改造为合乎人类需要的新的突变蛋白质。 2.3蛋白质工程进展 蛋白质工程是发展较快的分子工程。在进行蛋白质分子设计后，已可应用高效的基因工程来进行蛋白的合成。 最早的蛋白工程： Forsht等在1982-1985年，对酪氨酰-tRNA合成酶的分子改造。 根据XRD（X射线衍射）实测该酶与底物结合部位结构， 用定位突变技术改变与底物结合的aa残基， 用动力学方法测量所得变异体酶的活性。 Perry 1984年 将溶菌酶中Ile(3)改成Cys(3)， 进一步氧化生成 Cys(3)-Cys（97）二硫键， 提高了酶热稳定性。 福什特1987年将枯草杆菌蛋白酶分子表面的Asp（99）和Glu（156）改成Lys， 导致活性中心His（64）质子pKa从7下降到6，酶在pH＝6时的活力提高10倍。 此外，还可对酶的催化活性、底物专一性、抗氧化性、热变性、碱变性等加以改变。还有以某个典型的折迭进行“从头设计” (de novo or abinitio protein design) 1988年杜邦成功设计合成了由四段反平行α—螺旋组成为73aa的成果。预测结构的模型法，结合模型法，通过分子工程来预测高级结构，奠定分子生物学基