rhGH对大鼠脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡、血管的形成及Nestin表达影响.pdfVIP

摘要 提供)。随机分为假手术组(假手术+生理盐水组)、对照组(脑缺血再灌注+生 理盐水组)、治疗组(脑缺血再灌注+重组人生长激素组)三组，每组30只，每 缺血再灌注损伤模型。造模成功后，治疗组给予皮下注射rhGH，而对照组及假 手术组皮下注射生理盐水，其注射时间、部位及剂量同治疗组。 2组织切片的制备 大鼠断头取脑后，在相应时间点灌注、取材，常规固定、脱水、透明、浸 蜡、石蜡包埋，制成4rim切片，然后染色，分别进行凋亡细胞数计数、TTC法 显色、Nestin和CD34免疫组化染色。 3指标检测 (1)TUNEL法计算海马区细胞凋亡数目。 的新生血管数。 Photo (3)TTC法显示脑梗死区域，以Ulead 2．0图像分析软件进行脑 Express 梗死轮廓勾画，法医损伤测量软件测量脑梗死面积，脑梗死面积之和乘以切片 厚度即可得到脑梗死的近似体积； (4)图像分析 每只大鼠连续切片，每4张抽取一张切片，选取5个不同海马及周围区域 进行高倍镜(400X)观察，TUNEL法进行凋亡细胞计数，应用图象分析系统 对免疫染色的阳性细胞数进行定量分析，TTC染色，测量脑梗死面积。 4统计学方法 所有数据以2+S表示，采用SPSS13．0软件进行统计学处理，相同时间点不 同组间比较采用方差分析，组间比较采用t检验。以a=0．05作为检验性水准。 ’ ’ 结果 1 TUNEL法细胞凋亡计数变化 减少，差异有统计学意义(P0．05)。 2Nestin表达的动态变化 ．’ f 摘要 在假手术组海马区Nestin阳性细胞数有少量表达，差异无统计学意义；7d、 组，差异有统计学意义(PO．05)。 3∞34标记的新生血管的变化· 假手术组缺血周围仅有少量的新生血管，差异无统计学意义(P0．05)；对 血管数最多，随时问的延长而减少；不同时间点治疗组为15．43±0．69， (P0．05)。 4TTO法显示的脑组织形态学改变 假手术组未见梗死灶：对照组和治疗组可见白色梗死区域，与周围有明显 74．24+1．72mm3；对照组为：81．84±2．27mm3，118．694-5．79mm3， ‘ 。+ 异有统计学意义(PO．05)。 ： 结论 1．GH对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用，可缩小脑梗死体积，其机制 可能与抑制细胞凋亡有关。 2．GH可增加新生血管及Nestin阳性细胞数目，促进神经功能修复。 关键词 脑缺血再灌注损伤：GH；NestimTTC；CD34；TUNEL；大鼠 III HaitaoLiu Postgraduate Bai SupervisorHongying of DepartmentNeurology TheSecondClinical of Zhou CollegeZhengUniversity