20(S)人参皂苷Rg3对Lewis肺癌生长及转移抑制作用.docVIP

20(S)人参皂苷Rg3对Lewis肺癌生长及转移抑制作用 　 作者：倪劲松,辛颖,王心蕊,石博,陈迪,田阔 ,陈兰悦,吴家祥 毕业论文 【摘要】 目的 观察20（S）人参皂苷Rg3（SPGRg3）抗Lewis肺癌生长及转移的作用并探讨其作用机制。 方法 建立Lewis肺癌实体瘤模型及自发肺转移模型观察SPGRg3的抗肿瘤作用，并取Lewis肺癌C57BL/6荷瘤小鼠的脾脏，检测T淋巴细胞转化活性、NK细胞及IL2活性。结果 实体瘤实验中，3.0mg/kg和1.0mg/kg SPGRg3用药组瘤重明显低于溶剂对照组（Plt;0.05），0.3mg/kg组瘤重与溶剂对照组间无差异（Pgt;0.05）；SPGRg3用药组肺转移结节均明显少于溶剂对照组（Plt;0.05）；SPGRg3用药组Lewis肺癌C57BL/6荷瘤小鼠的脾细胞对ConA和IL2反应性以及NK活性均高于溶剂对照组（Plt;0.05）。结论 SPGRg3可抑制Lewis肺癌生长及转移，可能是通过提高荷瘤小鼠的免疫功能来发挥其抑瘤作用。 【关键词】 人参皂苷；肿瘤生长；肿瘤转移；免疫功能 Key words：Panaxosides；Neoplasm growth；Neoplasm metastasis；Immunological function 肿瘤一直是危害人类生命的顽疾之一，从中草药中开发抗肿瘤药物已成为国内外抗肿瘤新药开发的一个热点。SPGRg3系由西洋参中提取的单体皂苷，近年来其抗肿瘤作用逐渐受到瞩目， 研究 表明，SPGRg3可抑制肿瘤的转移及肿瘤新生血管形成[1,2]，并且可以通过抑制环氧化酶2的表达降低皮肤癌的发生[3]。本研究通过体内和体外实验，观察了SPGRg3抗Lewis肺癌生长及转移的作用，以及对 Lewis肺癌C57BL/6N荷瘤小鼠免疫功能 影响 ，探讨其可能的作用机制。 1材料与方法 1.1实验材料 毕业论文 SPGRg3（3mg/支，批号:980301）由本校基础医学院药物化学教研室提供，纯度gt;99.5%，注射前用生理盐水稀释成所需浓度，溶剂对照组含有溶剂和生理盐水。环磷酰胺，50mg/kg，上海华联制药有限公司。纯系C57BL/6N 小鼠，雌雄各半，体重18～22g，购于本校实验动物部，动物等级为普通级，合格证编号为101025。高转移Lewis肺癌细胞由本校放射生物实验室惠赠，培养于含10%新生牛血清的RPMI1640培养液中。 1.2SPGRg3对Lewis肺癌实体瘤生长的作用 无菌条件下，取Lewis肺癌实体瘤，用玻璃匀浆器加生理盐水(1∶3)磨制成细胞悬液，取0.2ml（含瘤细胞2×106）接种于C57BL/6N小鼠右腋窝皮下，接种后将动物随机分成5组：SPGRg3 3mg/kg、1mg/kg、0.3mg/kg组，阳性（环磷酰胺）及阴性（溶剂）对照组。次日腹腔注射SPGRg3，连续给药10d（1次/天），停药24h后处死动物，称体重及瘤重， 计算 肿瘤生长抑制率(%)，其值为［１-（ 治疗 组平均瘤重／对照组平均瘤重）］×100%。 1.3SPGRg3对Lewis肺癌自发肺转移的作用 取体外培养对数生长期Lewis肺癌细胞，以5×105/只接种于C57BL/6N小鼠右后肢爪垫皮下。随机分为4组，即SPGRg3 3mg/kg、1mg/kg、0.3mg/kg组及溶剂对照组。次日腹腔注射SPGRg3，连续用药5周（1次/天），在第3周截除荷瘤下肢，第5周末处死小鼠，取出肺组织用Bouins液固定，在解剖显微镜下（×10）计数肺组织表面肿瘤结节数。 论文代写 1.4SPGRg3对 Lewis肺癌C57荷瘤小鼠免疫功能影响 取Lewis肺癌实体瘤，按1∶3 加入生理盐水研磨成细胞悬液，取0.2ml（含瘤细胞1×106）接种于小鼠右腋皮下，次日腹腔注射SPGRg3(1.0mg/kg)，连续给药21d后处死动物、无菌条件下取脾脏，分别检测淋巴细胞转化活性、NK细胞活性以及对IL2反应活性[4]。 毕业论文 1.5统计方法 采用SPSS10.0统计软件， 应用 方差 分析 处理数据。 　 2结果 2.1SPGRg3对Lewis肺癌生长的抑制作用 3次体内重复实验均见SPGRg3用药组瘤重明显低于溶剂对照组，见表1，其中以3.0mg/kg和1.0mg/kg SPGRg3组效果非常显著（Plt;0.05），0.3mg/kg组效果不明显（P＞0.05），且3.0mg/kg SPGRg3组抑瘤率3次均在30%以上，说明SPGRg3具有明显地抑