HPLC法测定白土茯苓中β-谷甾醇含量.docVIP

HPLC法测定白土茯苓中β-谷甾醇含量 　 作者：支文星,程玉钏,李先荣 李先荣, 【摘要】 目的 建立白土茯苓中β-谷甾醇的含量测定方法。方法 采用高效液相色谱法,色谱柱为sinachrom ODS-BP(4.6 mm×250 mm,5 μm),甲醇-0.1%磷酸(98∶2)为流动相,检测波长为210 nm,流速为1.0 mL/min。结果 β-谷甾醇在0.22～8.8 μg范围内线性关系良好,r＝1.000 0；平均回收率为96.5%,RSD＝1.15%。结论 本方法简便准确,重复性好,可作为白土茯苓药材质量控制的有效方法。 【关键词】 β-谷甾醇；白土茯苓；高效液相色谱法；含量测定 　　Abstract：Objective To establish the method to determine the content of β-sitosterol in Rhizoma Heterosmilacis Japonicae. Method β-sitosterol in Rhizoma Heterosmilacis Japonicae was determined by HPLC. Chromatographic column was sinachrom ODS-BP 5 μm column (4.6 mm×250 mm). Mobile phase was methanol-0.1% H3PO4 liquor. Detection wavelength was 210 nm. Flow rate was 1.0 mL/min. Result β-sitosterol showed a good linear curve in the range of 0.22～8.8 μg (r＝1.000 0). The average recovery was 96.5% with RSD of 1.15%. Conclusion The method was accurate and reproducible, and can be used to control the quality of Rhizoma Heterosmilacis Japonicae. 　　Key words：β-sitosterol；Rhizoma Heterosmilacis Japonicae；HPLC；content determination 　　白土茯苓为百合科肖菝葜属植物肖菝葜、短柱肖菝葜、华肖菝葜的干燥块茎。春、秋二季采挖,除去须根及泥沙,洗净,趁鲜切片,晒干。其主要分布于湖南、四川、云南和贵州等地。白土茯苓味甘、淡,性平,主治小便淋涩、白浊、带下、痈肿疮毒。临床多用于治疗筋骨挛痛、瘰疬痈肿、梅毒、钩端螺旋体病。 　　国内外有关白土茯苓的研究较少。20世纪70年代,曾从白土茯苓中分离得到β-谷甾醇(β-sitosterol)、棕榈酸(palmaiticacid)和硬脂酸(stearic acid)等[1-4]。药理实验表明,β-谷甾醇具有明显的降胆固醇、止咳、抗癌、抗炎等药理作用[5]。目前报道的分析方法有薄层扫描法、气相色谱法、高效液相色谱-紫外检测法、高效液相色谱-ELSD法等[6-8]。本试验对白土茯苓中β-谷甾醇含量进行测定。在选定的色谱条件下,供试溶液中β-谷甾醇与相邻组分分离度良好。经方法学考察,方法的重复性、稳定性、精密度、加样回收率均符合有关规定,可用于该药材的质量控制。 　　1 仪器与试药 　　Aglient 1100高效液相色谱仪：AglientG四元泵(Quatpump), Aglient G1322A真空在线脱气机(Degrasser),Aglient G1313A自动进样器(ALS),Aglient G1315 DAD二极管阵列检测器, Aglient chimstation system(安捷伦化学工作站)；电子天平(德国赛多利斯,BP-211D型)；超声波清洗器(KQ3200DB型,昆山市超声仪器有限公司)。 　　三氯甲烷(天津市申泰化学试剂有限公司)；无水乙醇(北京化工厂)；甲醇(色谱纯,天津科密欧公司)；磷酸(北京红星化工厂)。β-谷甾醇对照品(中国药品生物制品检定所,批号11085-200504)；白土茯苓(山西振东药业提供,来源为贵州省安顺市多个县区,经本院李先荣教授鉴定为百合科肖菝葜属植物短柱肖菝葜)。 　　2 方法与结果 　　2.1 色谱条件 　　色谱柱：sinachrom ODS-BP(5 μm,4.6 mm×250 mm)；检测波长210 nm；流动相：甲醇-0.1%磷酸(98∶2)；流速：1.0 mL/min。理论塔板数