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不同产地天花粉药材中瓜氨酸含量测定
不同产地天花粉药材中瓜氨酸含量测定
作者:杨玉琴 ,张丽艳,李健,周萍
【摘要】 目的采用薄层色谱扫描法测定不同产地天花粉中瓜氨酸的含量,建立瓜氨酸的含量测定方法。方法展开剂:正丁醇-无水乙醇-冰醋酸-水(9.5∶2∶3.5∶3);显色剂:1%茚三酮试液;检测波长:λS=510 nm,λR=700 nm。结果瓜氨酸在0.200 8~2.008 μg时,与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999);平均回收率为99.12% ,RSD =1.12%。结论该方法操作简便,快速,准确,可用于瓜氨酸的含量测定。
【关键词】 天花粉 瓜氨酸 薄层色谱扫描法
Abstract:ObjectiveTo develop an TLC method for the determination of trichosanthin Citrullin content from different habitats.MethodsButanol-ethanol-acetic acid-H2O (9.5∶2∶3.5∶3) was used as the mobile phase, 1% ninhydrin test solution was used as reagent, the detection wavelength was λS=510 nm, λ R = 700 nm .ResultsThere was a good linear relationship within the range of 0.2008~2.008 μg. The average recovery was 99.12%, RSD=1.12%.ConclusionThe proposed method is simple,rapid and accurate.It can be used to determine the contents of Citrullin in Radix Trichosanthis..
Key words:Radix Trichosanthis.; Citrulline; TLC
天花粉为葫芦科植物栝楼Trichosanthes KiriLowii Maxim.或双边栝楼Trichosanthes rosthornii Harms的干燥根[1],性微寒,味甘,微苦,归肺、胃经。有清热生津,消肿排脓,抗癌之功效。用于热病烦渴,肺热燥咳,内热消渴等病证。本实验采用薄层扫描法[2]对不同产地天花粉进行测定,建立瓜氨酸的含量测定方法。
1 仪器与试药
1.1 仪器
CS-9301双波长薄层扫描仪(日本岛津);REPROSTAR3薄层色谱数码相机系统(瑞士卡玛);AE240电子天平[梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司];超声波清洗器(北京医疗设备厂)。
1.2 试药
瓜氨酸对照品( 中国药品生物制品检定所,供含量测定用,批号0875-200205);硅胶G机制板(山东青岛海洋化工厂);正丁醇、无水乙醇、冰醋酸等试剂均为分析纯。
1.3 药材天花粉药材为市售(购自重庆、贵州、广西、广东等地)及采集的野生样品(采自贵州省惠水、龙里、贵阳、清镇、高坡等地),经我院付志明老师鉴定为双边栝楼Trichosanthes rosthornii Harms的干燥根。
2 方法与结果
2.1 实验条件
2.1.1 扫描条件
扫描方式:双波长反射式锯齿扫描;扫描波长:λS=510 nm,λR=700 nm;狭缝宽度:0.4 mm×0.4 mm;线性参数:Sx=3。按扫描条件下操作,其薄层扫描图见图1。
2.1.2 色谱条件
展开剂:正丁醇-无水乙醇-冰醋酸-水(9.5∶2∶3.5∶3);显色剂:1%茚三酮试液。
2.2 对照品溶液的制备
精密称取瓜氨酸对照品适量于50 ml容量瓶中,加50%乙醇溶液溶解并稀释至刻度,制成0.502 mg/ml的溶液。精密吸取上述溶液2 ml于5 ml容量瓶中,加50%乙醇溶液稀释至刻度,制成0.200 8 mg/ml,即得对照品溶液,备用。
2.3 供试品溶液的制备
精密称取天花粉药材粉末(过60目筛)约0.12 g,于25 ml三角烧瓶中,精密加入50%乙醇溶液10 ml,称定重量;超声提取40 min,放冷,用50%乙醇补足减失重量,滤过,取续滤液作为供试品溶液。
2.4 标准曲线的制备
分别精密吸取对照品溶液1,2,4,6,8,10 μl分别点于同一硅胶G薄层板上,按上述色谱条件项下展开,显色扫描。以峰面积积分值为纵坐标,点样量为横坐标,绘制工作曲线。计算回归方程Y=3 581.8X-200.95,r= 0.996;瓜氨酸在0.200
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