人原发性肝内胆管细胞癌及其癌旁组织内雄激素受体临床探究.docVIP

人原发性肝内胆管细胞癌及其癌旁组织内雄激素受体临床探究 　　摘要：目的：对人原发性肝内胆管细胞癌及其癌旁组织内雄激素受体进行临床研究 。方法：选择我院自2013年1月至2015年1月收治的30例进行手术治疗的原发性肝内胆管细胞癌患者作为研究对象，将其肝内胆管细胞癌及其癌旁组织内雄激素受体含量与10例良性肝脏病变患者的肝内胆管胆管细胞胞核和胞浆的雄激素受体含量进行对比。结果：对照组10例患者的肝功能均正常，但在胞浆和胞核中均检测出雄激素受体，30例原发性肝内胆管细胞癌患者的癌组织和癌旁组织均检出雄激素，其浓度梯度分布为癌组织gt;癌旁组织gt;正常肝脏，且差异显著(plt;0.05)，具有统计学意义。结论：雄激素受体浓度与患者性别、年龄、酗酒情况、丙肝抗体、乙肝表面抗原、临床病理类型、甲胎蛋白含量、基础肝脏病变及细胞分化程度不存在直接或间接的联系，但提示原发性肝内胆管细胞癌的男性患者显著多于女性可能与雄激素受体的表达存在某种联系。 　　关键词：人原发性肝内胆管细胞癌;癌旁组织;雄激素受体;临床研究 　　原发性肝内胆管细胞癌(PICC)属于一种来源于肝内胆小管上皮细胞的恶性肿瘤，在我国的发病以男性居多，在近年来的发病率呈逐年上升的趋势。国内外的临床研究表明PICC的发生与雄激素的量密切相关[1]，因此，本研究探讨了原发性肝内胆管细胞癌及癌旁组织内的雄激素受体的量，从而进一步证实原发性肝内胆管细胞癌与雄激素的关系，现汇报如下。 　　1资料与方法 　　1.1临床资料 　　选择我院自2013年1月至2015年1月收治的30例进行手术治疗的原发性肝内胆管细胞癌患者作为研究对象，其中包括男患者26例，女患者4例，年龄分布为26～70岁，平均为(36.2plusmn;3.3)岁，此30例患者均经临床病理学诊断为原发性肝内胆管细胞癌。另外选择10例其他良性肝脏病变者作为对照组。 　　1.2取材方法 　　在患者进行手术治疗切除肿瘤后，于5min内取一大小为1cm3 的组织，在不能切除的情况下直接在肿瘤上取材，后从另一肝段或至少距离肿瘤10cm处取同样大小的一块肝脏组织或癌周组织。随机取对照组患者的同样大小肝组织作为对照。留取足量的组织进行病理学检查，其余组织置于液氮中保存，在两周时间内完成雄激素受体含量的测定[2]。 　　1.3试剂选择 　　(1) TE缓冲液及TED GM缓冲液：调节PH值为7.4，置于4℃温度下保存。(2)非放射性R1881和17alpha;-[甲基-H]R1881：SA 3200.5GBq/mmol，其放化纯度在98%以上。(3)DCC悬液，将TEDGM加1%活性炭及0.1%的葡萄糖加T70。(4)STM和TEDGM缓冲液中加浓度为1mmol/L的PMSF液[3]。 　　1.4胞核和胞浆的制备 　　在0～4℃环境下将取材组织剪碎后加入TEDGM缓冲液，将其摇匀后在转速为800r/min的离心机中进行10min离心，取上清液置于转速为30000r/min的离心机中进行高速离心40min，之后所得上清液即为胞浆[4]。在首次离心后的沉淀物中加入STM缓冲液制成悬浮液，胞核及胞浆悬浮液的蛋白质浓度测定选择Lowry法。 　　1.5雄激素受体饱和结合分析 　　浓度为0.2～5.0nmol/L的3H-R1881与胞核、胞浆悬液进行结合反应。在反应进行中与游离的标记物进行配基，胞核反应液采用滤膜的方法进行滤过。应用LKB-120多道液仪器进行反应管放射强度的测量，应用Scatchard进行作图计算最大结合容量及平衡解离常数[5]。 　　1.6统计学方法 　　本研究中所有数据应用Stata医学软件进行分析，等级资料选择秩和检验对进行分析 ， 计量资料应用 t 检验分析 ， 应用卡方检验进行计数资料分析。当统计结果显示 Plt;0.05 时差异具有统计学意义 [6]。 　　2结果 　　对照组10例患者的肝功能均正常，但在胞浆和胞核中均检测出雄激素受体，检出蛋白含量分别为1.9～6.5fmol/mg和0.2～5.3fmol/mg。检测结果证实雄激素受体浓度与患者年龄、性别及肝脏的非肿瘤性疾病均无关。 　　30例原发性肝内胆管细胞癌患者的癌组织和癌旁组织的检出雄激素受体情况详情见表1，其中胞浆内含量低于胞核且其比例接近胞核的50%，其浓度梯度表现为癌组织gt;癌旁组织gt;正常肝脏，且差异显著(plt;0.05)，具有统计学意义。进一步证实雄激素受体浓度与患者性别、年龄、酗酒情况、丙肝抗体、乙肝表面抗原、临床病理类型、甲胎蛋白含量、基础肝脏病变及细胞分化程度不存在直接或间接的联系。 　　3讨论 　　原发性肝内胆管细胞癌(PICC)属于一种来源于肝内胆小管上皮细胞的恶性肿瘤，在近年来的发病率呈逐年上升的趋势，在我国原发性肝癌中的肝细胞癌多伴有肝硬