凝胶色谱法测定注射用盐酸头孢吡肟中高分子杂质.docVIP

凝胶色谱法测定注射用盐酸头孢吡肟中高分子杂质 　【摘要】; 目的 建立测定注射用盐酸头孢吡肟中高分子杂质(头孢吡肟聚合物)的方法。方法 采用分子排阻凝胶色谱自身对照外标法进行定量，用葡聚糖凝胶G10(40～120 μm)为填料，流动相A为0.1 mol/L磷酸盐缓冲液(pH=7.0)，流动相B为超纯水，流速为1.0 mL/min, 检测波长为254 nm。结果 注射用盐酸头孢吡肟的高分子杂质含量均小于0.5％。结论 本法快速、简便，可用于注射用盐酸头孢吡肟高分子杂质的质量控制。 【关键词】; 盐酸头孢吡肟 凝胶色谱法 高分子杂质 　　Abstract:Objective; To establish a method for determining high molecular weight impurities in cefepime hydrochloride; injection. Methods Quantification of high molecular weight impurities in cefepime hydrochloride injection was determined by Sephadex G10 column chromatography with external standard method. The mobile phase consisted of 0.1 mol／L phosphate buffer(pH7.0) and supper pure water．The flow rate was 1.0 mL／min and detection wavelength 254 nm. Results; The content of high molecular weight impurities in different batches of cefepime hydrochloride injection was less than 0.5％．Conclusion This method was sensitive and accurate for determining high molecular weight impurities in cefepime hydrochloride injection. 　　Key words: cefepime hydrochloride; sephadex G-10; high molecular weight impurities 　　注射用盐酸头孢吡肟（cefepime hydrochloride）是20世纪90年代上市的第四代头孢菌素，本品抗菌谱广，药效强。实验研究表明，控制产品中高分子杂质是减少β-内酰胺类抗生素过敏反应的重要途径之一 ［1］。《中国药典》2005年版采用凝胶色谱自身对照外标法定量测定β内酰胺类抗生素中的聚合物，而盐酸头孢吡肟不能完全缔合，无法采用“自身”对照外标法定量，根据《中国药典》2005年版二部阿莫西林聚合物检验方法，可以用结构与研制产品类似，且能够完全缔合的其他药物制备对照品，进行自身对照外标法定量［2-3］。本文用与头孢吡肟结构及分子量相近的头孢噻肟作对照品，建立了测定注射用盐酸头孢吡肟中高分子杂质(头孢吡肟聚合物)的方法。 　　1; 仪器与试药 　　1.1; 仪器 　　DHLA电脑恒流泵(上海泸西分析仪器厂)，UVD6802紫外检测仪(上海金达生化仪器厂)，HW2000色谱工作站(南京色谱软件有限公司)。 　　1.2; 试药 ; 　　头孢噻肟对照品(批号130483-200102，中国药品生物制品检定所)；注射用盐酸头孢吡肟(批号060330、060731、060830，广州白云山天心药业股份有限公司)。 ; 　　磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸、氢氧化钠均为分析纯；水为二次重蒸馏水；葡聚糖凝胶(Sephadex)G10和蓝色葡聚糖2000为Amersham Bioscience公司产品。 　　2; 方法与结果 　　2.1; 色谱条件 ; 　　色谱柱为玻璃色谱柱（40 m×1.5 cm），内填Sephadex G10凝胶；流动相A为pH7.0的0.1 mol/L磷酸盐缓冲液(取磷酸氢二钠21.85 g和磷酸二氢钠6.08 g，加水1 000 mL，调pH值为7.0)，流动相B为超纯水；流速为1.0 mL/min；检测波长为254 nm。 　　2.2; 系统适用性试验［4］ ; 　　分别以流动相A、B为流动相，取0.1 mg/mL蓝色葡聚糖2000溶液200 μL注入色谱仪，理论塔板数按蓝色葡聚糖2000峰计算分别为1 968、1 639，拖尾因子分别为1.7、