紫外_可见分光光度法在植物多糖含量测定中应用_苏玉顺.pdf

第 28卷,第 3期 光　谱　实　验　室 Vol . 2 8, No . 3 2 0 1 1年 5 月 Chinese Journal of Spectroscopy Laboratory May , 2 0 1 1 紫外-可见分光光度法在植物多糖含量 测定中的应用① ②a,b a ,b 苏玉顺　李艳君　赵方振　周婷婷 　范国荣 (第二军医大学生物技术本科 2008级　上海市翔殷路 800号　200433) a (第二军医大学药学院药物分析学教研室　上海市国和路 325号　200433) b [上海市药物(中药)代谢重点实验室　上海市国和路 325号　200433] 　　紫外-可见分光光度法( UV-Vis)是目前国内比较常见的一种光谱学测量方法。 且近年来,其 在植物多糖含量测定领域的应用越来越多。 本文从 UV-Vis测定植物多糖含量过程中的显色剂选取、各种 条件的优化以及具体应用等方面进行综述。 　紫外-可见分光光度法;植物多糖;综述 : O657. 32　　　: A　　　: 1004-8138( 2011) 03-1101-07 1　引言 [ —1 5] [6] 多糖是各种植物中的重要有效成分,具有抗氧化损伤 、抗肿瘤、抗癌抗菌 、免疫调节、抗 [7 ] 炎症 等多种生物活性作用。植物多糖含量的测定对植物资源开发利用,尤其是中草药产业的发展 提供了技术支持,在药物和食品加工业具有重要意义。 随着研究的不断深入,植物多糖的含量测定 方法越来越多。其中常见的方法包括化学滴定法、色谱法、光谱法等多种方法。然而化学滴定法步 骤繁琐,重复性、准确度差,且实验操作的细微偏差对结果影响很大,而色谱法定性能力较差、分析 能力受限于检测器、购置与使用费用偏高、需消耗有机溶剂。 紫外-可见分光光度法 ( UV-Vis)是近年来应用于多糖含量测定最为广泛的方法。 它是依据 Lambert-beer定律,利用物质分子对 200— 760nm 内电磁波的吸收特性建立起的光谱分析方法,以 其较高的灵敏度和准确度,操作快捷,仪器设备简单且适合于植物多糖的含量测定等优点受到广大 研究者的关注。 本文就近几年紫外-可见分光光度法在各种植物多糖含量测定中的应用及其研究进展进行综 述。 2　显色剂的选择 利用 - 测定多糖含量的方式很多,包括根据糖的还原性测定 3, 5-二硝基水杨酸比色法 UV Vis 和 Somogyi-Nelson法。 目前,国内测定植物中多糖含量主要是利用多糖在浓硫酸作用下迅速脱水 成糠醛或羟甲基糠醛,再由酚类、芳胺类等检测剂与之反应,生成具有特定颜色的有机化合物,在一 定范围内,颜色的深浅与糖的含量成正比。 根据显色剂的不同,已知的显色方法有苯酚-硫酸法、蒽 ① 国家自然科学基金资助项目( No. ② 联系人,电话: ( 021) E-mail: ting0618@ tom. com; tianm fan@ sina. com 作者简介: 苏玉顺( 1990— ) ,男,河 省沧州市人,在读本科,主要从事多糖分离分析研究工作。 收稿日期: 2010-08-10;接受日期: 2010-09-02 1102 光谱实验室 第 28卷 酮-硫酸法、地衣酚-硫酸法、咔唑-硫酸法等。由于咔唑有剧毒,故前 3种方法比较常用。本文主要就 前 3种方法加以介绍。 2. 1　- 苯酚-硫酸比色法主要用于甲基化的糖、戊糖、寡糖类以及多聚糖的测定,甚至可以用于糖肽和 糖蛋白的测定。此法优势在于可以进行大量样品的测定,实验时基本不受蛋白质存在的影响,且产