复方丹参注射液抗睾丸缺血再灌注损伤实验探究.docVIP

复方丹参注射液抗睾丸缺血再灌注损伤实验探究 　【摘要】 目的探讨复方丹参注射液抗缺血再灌注损伤作用。方法建立人尸睾丸离体缺血再灌注损伤模型，用复方丹参注射液干预后，观察睾丸形态结构，并以TUNEL技术显示生精细胞凋亡，NADPHd法显示一氧化氮合酶（NOS）活性，硝酸盐还原酶法测定组织匀浆NO含量。结果缺血再灌注使睾丸组织结构破坏，生精细胞凋亡指数增高，NOS活性增强，NO合成增多；复方丹参注射液干预明显改善了睾丸组织形态，并使细胞凋亡指数和NO生成量显著下降，NOS活性降至正常水平。结论活血化淤中药复方丹参注射液具有显著的改善缺血再灌注损伤作用，调节NOS活性，降低损伤组织中NO水平可能是其作用机制之一。 【关键词】 缺血再灌注损伤； 睾丸； 丹参； 细胞凋亡； 一氧化氮 ChinaAbstract：ObjectiveTo explore the protective mechanism and effect of compound salvia miltiorrhiza injection against ischemia-reperfusion injury (IRI). MethodsThe isolated human testes IRI model was set up, and compound salvia miltiorrhiza injection was used in the experimental group. Histological changes were observed, cell apoptosis was detected by TUNEL technology, activity of nitric oxide synthetase (NOS) was detected by NADPHd method, and concentration of nitrous oxide （NO）was detected by nitrate reductase method.ResultsIschemia-reperfusion could destroy histological structure of testes; the apoptotic index, the NOS activity and the NO concentration were increased. Compound salvia miltiorrhiza injection could down-regulate all indexes. ConclusionCompound salvia miltiorrhiza injection can prevent the tissue from IRI by regalating the No level. 　　Key words： Ischemia-reperfusion injury； Testes；Salvia Miltiorrhiza；Apoptosis；Nitrous oxide 缺血再灌注损伤（ischemia reperfusion injury，IRI）的机制和防治研究对休克治疗、动脉搭桥、溶栓疗法、心脏外科体外循环、断肢再植和器官移植等临床技术的发展具有重要意义。一氧化氮（nitrous oxide，NO ）可能在缺血再灌注所致组织器官结构和功能损伤的过程中起了重要作用［1］。我们建立人尸睾丸离体缺血再灌注损伤模型，用活血化淤中药复方丹参注射液进行干预后，观察睾丸的组织形态、生精细胞凋亡指数、一氧化氮合成酶（nitric oxide synthetase，NOS）活性及NO含量的影响，了解该药抗缺血再灌注损伤的作用及机制。 　　1 材料与仪器 26人捐赠尸睾。复方丹参注射液［20 g·（10ml）-1，每毫升含相当于原生药丹参Salvia miltorrhiza Bge，降香Dalberga odorifere T. chen各1g，批号001208，华西医科大学制药厂提供］；高渗枸橼酸盐嘌呤液(规格为每袋500 ml，上海市血液中心)。SDJS-2型精密输液器即蠕动泵（浙江新昌国康仪器厂），小型三用水浴箱（温度范围37～100℃，温波1℃，北京市医疗设备厂）。 　　2 方法 　　2.1 睾丸离体缺血再灌注损伤模型建立 　　26对睾丸离体后立即置于4℃高渗枸橼酸盐嘌呤液中，剔除鞘膜及多余结缔组织，精索动脉插管固定，4℃高渗枸橼酸盐嘌呤液灌洗至精索内静脉流出液清亮后，备用。其中6对睾丸立即取材作正常对照（12只）。其余20对睾丸中，每两只分别分配到缺血再灌注组（20只）和复方丹参组（20只）。缺血再灌注组用4℃高渗枸橼酸盐嘌呤液低温灌洗至精索内静