复方四君子汤影响小白鼠抗腹泻机能初步探究.docVIP

复方四君子汤影响小白鼠抗腹泻机能初步探究 　　　【摘 要】本实验依据中医基础的辨证论治理论，采用体外抑菌实验（平皿纸片法），观测复方四君子汤与常用抗生素（诺氟沙星、头孢氨苄）的抑菌效果，以及体内抑菌实验（灌胃大肠杆菌），观测昆明种小白鼠在10小时之内腹泻情况，研究复方四君子汤的抑菌效果和机理，判断复方四君子汤作为饲料添加剂以提高动物抗腹泻作用的可能性。 　　【关键词】复方四君子汤 小白鼠 抗腹泻 饲料添加剂 　　 　　腹泻是养殖业比较棘手的一个问题，对养殖业造成极大的危害。目前，国内外对动物中草药饲料添加剂在促进生长发育和提高繁殖能力方面做了不少研究，但对其在抗菌防病方面的研究还不是很多。为此国内外许多学者对应用中草药饲料添加剂抑制动物腹泻进行了大量的研究，但迄今为止，关于这方面的实验多只有体内或体外实验，本实验综合两种实验方法来研究复方四君子汤作为饲料添加剂抗腹泻的机理和优势。 　　 　　1 材料与方法 　　 　　1.1实验材料 　　实验动物：昆明种小白鼠70只，体重在16～18g，雌雄各半，购于南京中医药大学动物实验中心。 　　实验药物：复方四君子汤方剂，大黄（由南京农业大学中药房提供），大肠杆菌原液（由南京农业大学动物科学院传染病组提供），伊红美兰试剂，诺氟沙星胶囊，头孢氨苄胶囊。 　　实验器材：高压灭菌锅，无菌操作台，100ul移液枪，培养皿，显微镜。 　　1.2 实验步骤 　　（1）制备伊红美兰培养基 　　（2）制备大肠杆菌母液 　　（3）制备复方四君子汤和大黄煎剂 　　（4）制备药敏纸片 　　（5）确定致小鼠腹泻的菌液浓度 　　（6）体外抑菌实验 　　（7）记录结果 　　 　　2 结果与分析 　　 　　2.1体外抑菌实验结果见表1 　　 　　文献记载，抑菌斑直径≤8mm为抑菌不敏感，在8～13mm之间为低度敏感，在13～19之间为中度敏感，在19～25之间为高度敏感。从表1可以明显地看出，复方四君子汤组与空白组无差异，对大肠杆菌不敏感；诺氟沙星组和头孢氨苄组对大肠杆菌有极为显著的抑制作用（Plt;0.01），为高度敏感型。说明复方四君子汤不能直接杀灭大肠杆菌。 　　　2.2体内抑菌实验结果见表2 　 　　从表2可以看出，脾虚组小鼠出现腹泻次数最多，中药组最少，与空白组相比，脾虚组腹泻差异极显著（Plt;0.01），而脾虚中药组抗腹泻效果显著（Plt;0.05），中药组抗腹泻效果极显著（Plt;0.01）。从灌服大肠杆菌到腹泻的时间上来看，脾虚组最早出现腹泻，脾虚中药组最迟出现；从腹泻小鼠数来看，脾虚组最多，中药组最少。说明复方四君子汤可以提高机体的抗腹泻能力。 　　3 讨论 　　 　　复方四君子汤是由四君子汤加黄芪，香薷而成。四君子汤出自宋代《太平惠民和剂局方》， 　　甘温益气，健脾养胃，是治疗脾虚泻泄，运化无力的常用方剂。有实验报道，使用四君子汤可提高脾虚小鼠吞噬细胞的吞噬功能和红细胞免疫功能。黄芪味甘性微温，可“补益元气而托毒”，“治一切气衰血虚之证”，具健脾补虚之功效，对动物免疫系统有广泛影响，包括对体液免疫﹑细胞免疫的调节等。香薷具有健脾化湿之功效，其挥发油能刺激消化腺分泌，促进胃肠蠕动，且有较好的抑菌作用。 　　研究资料表明：黄芪和四君子汤没有明显的抑菌作用，但香薷具有广谱抗菌、杀菌作用，且其抗菌效果相当稳定。刘静等（1996年）研究表明香薷对耐药菌株也同样有效，同时有抗毒﹑抗炎﹑提高免疫应答﹑拮抗肠肌痉挛等作用。在本实验中，体外实验结果表明，复方四君子汤对大肠杆菌没有明显的抑制作用，而体内实验结果显示，给小鼠灌胃相同量的大肠杆菌后，脾虚组小鼠出现腹泻的数量最多，腹泻量也最大，出现病理反应时间也最短，其次为空白组，脾虚中药组，最后是中药组，说明复方四君子汤具有体内抑菌效果。 　　从实验可以看出，复方四君子汤可以显著减少动物的腹泻，并且能提高动物机体的免疫能力，从而促进动物的生长发育，提高饲料的利用率。因此，复方四君子汤可以作为一种安全有效的饲料添加剂，用于养殖业中，以提高养殖业的效益。研究安全、高效的中草药饲料添加剂是今后的研究重点。 　　 　　参考文献: 　　[1]钟清莲，林峰，林胜芳.仔猪秋冬腹泻不要乱用抗生素.中国兽药杂志，1995，29（4）：61. 　　[2]王刚，魏平华.猪用中草药饲料添加剂应用研究.2003，7（2）：40. 　　[3]赵荣山，杨会锁，郝京生，等.小鼠细菌性腹泻模型的诱导方法，现代中西医结合杂志.2000，9（13）：7. 　　[4]北京市中医研究所，北京中医院.有关脾气虚实质的临床观察和实验研究.中华医学杂志，1998，62（1）：22. 　　[5]邱春健.四君子汤的药理研究及临床应用.中成药，