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微生物法测定青霉素残留量探究 　 【摘要】; 目的 建立测定青霉素残留量的微生物法。方法 利用抗生素在琼脂培养基内的扩散作用，采用管碟法对培养温度、青霉素的最低检测限及试验用菌种ATCC941a对硫酸链霉素的最大耐受量等条件进行研究。结果 培养温度确定为28℃，青霉素的最低检测限为0.008u/mg，试验用菌种ATCC941a对硫酸链霉素的最大耐受量为60mg/ml。结论 该方法灵敏度高，可用于青霉素残留量的测定。 毕业论文 【关键词】; 管碟法； 青霉素残留量； 含量测定 毕业论文 　　Penicillin residue assay by microbiological method ; 　　ABSTRACT; Objective; To establish a microbiological method for penicillin residue assay.; Methods The parameters including culture temperature, limit of detection (LOD) of penicillin and the maximum tolerance dose of experimental strain ATCC9341a to streptomycin sulfate were detected by cylinder?plate method. Results; The culture temperature was 28℃ and the LOD of penicillin was 0.008 u/ml, and the maximum tolerance dose of experimental strain ATCC9341a to streptomycin sulfate was 60 mg/ml.; Conclusion; This method was sensitive and can be used for penicillin residue assay. ; 　　KEY WORDS; Cylinder?plate method Penicillin residue Assay 毕业论文 　　青霉素类药物仍是目前常用的抗菌药，但其过敏反应一直危害着患者的身体健康。美国联邦法规中指出，若有相互污染的可能性，非青霉素药品应化验是否含有微量青霉素；若能测出有微量青霉素存在，则本批药品不可出售。本文以青霉素标准品，就微生物法测定青霉素残留量的各影响因素进行了研究探讨，建立了测定青霉素残留量的微生物法。该方法灵敏度高，可用于青霉素残留量的测定。 毕业论文 　　1; 试剂与材料 毕业论文 　　1.1; 试剂 ; 　　ChPⅡ培养基，USPⅠ培养基，1% pH6.0磷酸盐缓冲液，1000u/ml青霉素酶溶液，藤黄八叠球菌ATCC9341a，0.9%的氯化钠溶液，青霉素标准品。 毕业论文 　　1.2; 仪器与用具 ; 　　生化培养箱(15～40℃)，超净工作台，钢管，钢管放置器，培养皿。 毕业论文 　　2; 试验方法 毕业论文 　　2.1; 菌液的制备 ; 　　将工作用菌种ATCC9341a的斜面培养物，接种于USPⅠ号培养基斜面，32～35℃培养24h，用0.9%的氯化钠溶液洗涤，用前用0.04u/ml的青霉素标准液标定，每100ml培养基中加菌量所致抑菌圈直径15～18mm为宜。 毕业论文 　　2.2; 双碟平板的制备 ; 　　向已熔化并放置40～50℃的培养基中加入适量ATCC9341a菌液，摇匀。取菌液10ml，加入已灭菌的双碟中，待培养基凝固后，于每个双碟中放入4枚小钢管。 毕业论文 　　2.3; 培养基及培养温度的选择 ; 　　精密称取青霉素标准品15～20mg，用1% pH6.0磷酸盐缓冲液稀释至0.04u/ml的标准溶液，分别用ChPⅡ培养基，USPⅠ培养基制备双碟平板，滴碟后室温放置1～2h，分别于28和37℃恒温培养16～18h，测定抑菌圈直径。 毕业论文 　　2.4; 培养温度对青霉素最低检测限的影响 ; 　　精密称取青霉素标准品15～20mg，用1% pH6.0磷酸盐缓冲液稀释为0.015、0.01、0.08和0.007u/ml。用“2.3”中选出的最佳培养基(ChPⅡ)制备双碟平板，每个浓度至少滴加10个钢管，滴碟后室温放置1～2h，分别于28和37℃恒温培养16～18h，测定抑菌圈直径，计算平均值。 毕业论文 　　2.5; 试验用菌种ATCC941a对硫酸链霉素的最大耐受量等条件进行研究 ; 　　精密称取硫酸链霉素250、300和350mg分别加入