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正交实验优选二葛解酒颗粒提取工艺探究
正交实验优选二葛解酒颗粒提取工艺探究
【摘要】 目的优选二葛解酒颗粒的最佳提取工艺。方法采用正交实验法,以葛根素含量为考察指标,比较不同乙醇浓度、溶剂用量及提取时间对提取效果的影响。结果最佳提取条件为10倍量50%乙醇,1.5 h/次,80℃回流提取3次。结论该工艺所得葛根素含量较高,稳定性、重现性好,可为二葛解酒颗粒的制备提供参考资料。
【关键词】 二葛解酒颗粒 葛根素 正交实验 提取工艺
Abstract:ObjectiveTo optimize the extraction technology of Ergejiejiu Granule. MethodsOrthogonal test was carried out.The influence of solvent concentration,the dosage of solvent,and time of extraction on extraction results were investigated with the content of puerarin as index.Results The optimum extraction was described as follows:the concentration of alcohol was 50%,volume of alcohol was 10 times amount of raw herb,and the herb was extracted 3 times with 1.5 h and 80℃ for each time.ConclusionHigh content of puerarin is obtained with the present technology.The method is stable and replicable and it can provide reference for preparation of Ergejiejiu Granule.
Key words:Ergejiejiu Granule; Puerarin; Orthogonal test; Extraction technology
少量饮酒能活血通络散寒,如恣饮无度,则成为“酒毒”而伤人肺腑[1]。许多资料表明[2],急性酒精中毒严重时可导致意识障碍,呼吸和循环衰竭,甚至危及生命。很久以来,人们就采用各种方法来解除和减轻饮酒所带来的不适,然而效果不甚明显。因此,研究与开发有效的解酒药物是医药市场的迫切需求。二葛解酒颗粒由葛根、川芎、葛花等组成,临床实践证明其对酒精中毒具有良好的治疗和预防作用。而作为君药的葛根主要含有葛根素等黄酮类化合物,现代药理学证明,葛根素对酒精中毒有显著的治疗作用[3]。本文采用正交实验法,以葛根素为检测指标,对二葛解酒颗粒的提取工艺进行优化选择。
1 材料
2450型紫外分光光度计(日本岛津)。葛根购于武汉市老百姓大药房,川芎、葛花购于湖北中医学院附属医院,符合《中国药典》(2005年版一部)各药材项下之规定。葛根素对照品(中国药品生物制品检定所,批号752-200108),其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 正交实验设计采用L9(34)正交表进行实验,以提取所得葛根素总量为指标,考察溶剂乙醇浓度(A)、提取时间(B)、溶剂用量(C) 3种因素对提取结果的影响。因素水平详见表1。表1 正交实验因素水平(略)
2.2 提取工艺据文献报道[4],条件一定时温度越高,葛根素提取率增加,但到70℃后,提取率变化不明显。常压下,体系在70~80℃附近溶剂沸腾,沸点还要受到溶剂浓度的影响。故按处方称取葛根、葛花、川芎,按表2排定的实验,于80℃进行回流提取,每个样品提取3次,分别将3次滤液合并。
2.3 含量测定
2.3.1 对照品溶液的配制取葛根素对照品适量,于105℃恒温干燥2 h,精确称取0.331 6 g,置于100 ml容量瓶中,用30%乙醇 3.35 ml温热3~5 min,溶解后加乙醇定容至100 ml。从上述溶液中吸取1 ml置于100 ml容量瓶中,用乙醇定容至100 ml,即得葛根素标准液(33.16 μg/ml)。
2.3.2 测定波长的确定将葛根素标准液、样品供试液在200~400 nm波长范围内进行光谱扫描,发现标准对照品在250 nm处有最大吸收且待测样品有较大吸收,故选择250 nm为测定波长。
2.3.3 标准曲线的绘制取33.16 μg/ml的葛根素标准液0.2,0.4,0.6,0.8,1.0 ml,分别置于10 ml容量瓶中,并分别加30%乙醇至3.35 ml后,加蒸馏水至刻度,摇匀。
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