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正交法优化葛根超临界提取工艺探究 　 作者：王龙虎，叶秀珠，宋彦廷，刘雪松，陈勇 【摘要】 目的 研究超临界萃取工艺提取葛根浸膏的新技术。方法 采用正交试验法，以葛根素的提取率为技术指标，考察原料、温度、压力、CO2流量萃取时间和共溶剂用量等工艺条件对提取效果的影响。结果 确定如下超临界提取葛根的优选条：原料葛根粉碎到平均粒度（0.20mm），加入（1：1，w/w）共溶剂乙醇，在50℃和25mPa下，以15L/h流量的CO2萃取3h，葛根素的提取率达到1.85%，高于文献报道的微波提取方法。结论 乙醇辅助超临界提取葛根方法具有快速、高效和浸膏杂质少的优点。 【关键词】 葛根；葛根素；高效液相色谱；超临界流体萃取 【Abstract】 Objective To investigate supercritical fluid extraction（SFE）of Radix Puerariae.Methods Conditions for the supercritical CO2 extraction were studied by orthogonal experimental design according to the content of puerarin in the extract.Results The optimum conditions for SFE of Radix Puerariae were found as 50℃,25mPa,using the ethanol as the modifier（1:1,w/w）,and with the CO2 flow rate of 15L/h for 3h.The most content of Puerarin was determinate by HPLC after the collection,the extraction rate reach 1.85%.Conclusion The experimental results can be used for confirming process for extraction of Radix Puerariae and for the industrial production. 【Key words】 Radix Puerariae;Puerarin;HPLC;supercritical fluid extraction 葛根为豆科植物野葛Puerariae lobata（Willd.）Ohwi的干燥根，系常用中药，《中国药典》收载。葛根素是葛根的主要有效成分，在降低血压和心肌耗氧量、抗心律失常和限制心肌梗死范围等方面具有较好疗效［1］。目前，文献报道的从葛根中提取分离葛根素的方法有乙醇加热回流法、渗滤法、超声提取、微波辅助萃取和加压溶剂提取等［2～7］，这些方法大多存在工艺流程长、耗费大、提取效率低、有机溶剂残留等缺点。超临界萃取（Supercritical Fluid Extraction,SFE）具有工艺流程短、提取效率高、无污染等诸多优点。CO2是唯一工业化应用的超临界流体，其超临界状态较易达到，而且对产品无副作用，故在中药浸膏和有效组分的提取中应用很广泛［8～10］。 由于葛根的主要有效成分是以葛根素为代表的异黄酮类化合物，这些物质一般在CO2的溶解度较低，单纯的超临界CO2萃取的效果很差。本文采用加入共溶剂的改良工艺，取得了较好的提取率，为葛根提取工艺的研究和开发提供了新的技术思路。 1 仪器与药品 超临界萃取装置由江苏南通华安超临界萃取有限公司提供，型号为HA220-50-06。超临界流体萃取的工艺流程如图1所示。葛根药材（杭州中药饮片厂）；葛根素对照品（浙江省药检所）；CO2（纯度≥99%，由杭州凯天气体公司提供）；95%乙醇（药用级）。 2 方法 2.1 葛根素的含量测定方法 2.1.1 高效液相色谱条件 色谱柱：C18色谱柱（250mm×4.6mm,5μm）；流动相A为纯水；流动相B为甲醇，线形梯度洗脱，程序为0～15min内，B体积分数25%～30%；15～16min内，B体积分数30%～70%；16～20min内，B体积分数70%；20～21min内，B体积分数70%～25%；检测波长250nm；进样量10μl；柱温35℃；流速0.7ml/min。1 CO2钢瓶 2 净化器 3 携带剂 4 冰箱 5 混合器 6 净化器 7 萃取缸 8 分离器Ⅰ 9 分离器Ⅱ 图1 临界流体萃取实验装置 2.1.2 对照品溶液的制备 精密称取葛根素对照品20.5mg，置10ml量瓶中，加75%甲醇水溶液稀释至刻度，摇匀；精密吸取1.0ml，置25ml量瓶中，加75%甲醇溶