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正交设计法优化野菊花中蒙花苷提取工艺 　 作者：张 明，程文明*，李 俊，陆维丽，张云静，张群林 【摘要】 目的为野菊花中主要黄酮成分蒙花苷提取工艺的确定提供实验依据。方法采用正交设计的方法优化提取方案，RP-HPLC法测定蒙花苷的质量分数。结果最终确定优化提取方案为80%乙醇，按8倍药材质量的溶剂量，提取3次，每次2 h。结论提取溶剂量和提取时间对提取效率具有显著影响，应加以控制。优化方案提取效率明显高于正交设计中所有9个实验的提取效率。 【关键词】 正交设计; 野菊花; 蒙花苷; RP-HPLC; 提取工艺 　　Abstract：ObjectiveTo provide a basis for the optimum extraction technology of Linarin from Chrysanthemum indicum L.. 　　MethodsThe orthogonal design and RP-HPLC method were used. 　　ResultsThe optimum extraction condition was selected as eight times amount of 80% alcohol and refluxing 2 h repeatedly for 3 times. 　　ConclusionThe volume of solvent and extracting time had obvious effect on the extracting efficiency of the three flavonoids in Chrysanthemum indicum L. The optimal method is superior to the nine experiments in orthogonal design. 　　Key words： Orthogonal design; Chrysanthemum indicum; Linarin; RP-HPLC; Extraction technology 　　野菊花为菊科植物野菊Chrysanthemum indicum L.的头状花序，别名为野黄菊花、苦薏、山菊花、甘菊花，作为常用药材收录于2005版《中国药典》(Ⅰ部)中。其性凉，味苦、辛，归肺、肝经，具有清热解毒、消散痈肿、疏风平肝之功效，在我国的药用历史悠久。现代药理证明：野菊花具有广谱抗菌、抗病毒、降压、增加冠脉血流量、清除活性氧自由基等作用。现今临床上已将野菊花应用于风热感冒、高血压病、肺炎、口疮、痈疖等疾病的治疗[1]。蒙花苷为野菊花中黄酮化合物的代表成分，在野菊花中有较高的含量。本实验以其质量分数为指标，采用正交设计法，从提取溶剂、提取时间、溶剂量以及提取次数入手，对蒙花苷的提取工艺进行优化。 　　1 试剂与仪器 　　无水乙醇(上海振兴化工厂，批号：200905317)、甲醇(购自江苏科瑞思特工贸有限公司，批号：200705288)、双蒸水(自制)、冰醋酸(国药集团化学试剂公司，批号：。除甲醇为色谱纯外，其余试剂均为分析纯。蒙花苷(批号：111528-200303)对照品均购自中国药品生物制品检定所。 　　蒸发回流装置、水浴锅、岛津LC-20A高效液相色谱仪、岛津SIL-20A自动进样器、岛津CTO-10As VP柱温箱、岛津SPD-20AU紫外检测器、十万分之一分析天平。超声提取器(昆山市超声仪器有限公司)。 　　2 方法与结果[2] 　　2.1 提取工艺的筛选提取工艺设计：取野菊花药材3 g各9份，根据有关资料和预实验，以提取溶剂(A)、溶剂量(B)、提取时间(C)、提取次数(D)为考察因素，每个因素选择3个水平，选用L9(34)正交表进行实验，以蒙花苷百分含量为考察指标，按照L9(34)正交设计实验表进行实验，提取液置于容量瓶中，用提取溶剂定容至刻度。因素水平表见表1。表1 因素水平表 　　　2.2 色谱条件色谱柱：大连依利特ODS C18(4.6 mm×250 mm，5 μm)色谱柱; 流动相：A相为甲醇，B相为2.5%冰醋酸水溶液，进行梯度洗脱，0～12 min，由85%～80%，12～15 min，由80%～72%，15～25 min，由72%～60%，25～40 min，由60%～45%，40～50min，由45%～5%，50～60 min为5%;流速：1 ml/min;柱温：35 ℃;进样量：20 μl;检测波长：326 nm。图1 蒙花苷标准品HPLC色谱图 　　2.3 标准品的制备精密称取蒙花苷标准品1.0 m