新型Cu_2_IDA金属螯合亲和膜制备及吸附蛋白质性能的研究.pdfVIP

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新型Cu_2_IDA金属螯合亲和膜制备及吸附蛋白质性能的研究

食品工业科技 研究与探讨 Vol.28,No.06,2007 2+ 新型Cu-IDA金属螯合亲和膜制备 及吸附蛋白质性能的研究 李 美,杨严俊 (江南大学食品科学与安全教育部重点实验室江南大学食品学院,江苏无锡 ) 214036 数量、位置和空间构象不同,因而与金属螯合物的亲 摘 要:以纯棉布为载体,环氧氯丙烷 为交联活化剂,亚氨基 (EPI) 二乙酸( )为配基,可制备 2+ 金属螯合亲和 和力大小不同,从而可选择性地加以分离纯化。不同 IDA Cu-IDA 膜,并对影响活化和偶联反应条件的因素包括NaOH浓 的金属离子 (如 2+ , 2+ , 2+ , 2+ Cu-IDAZn-IDANi-IDAFe- 度、反应时间、反应温度、 用量等进行了研究。实验表 IDA 和 3+ )其亲和力的大小不同,其中 2+ 明,浸没在2.0mol/LNaOH中的纯棉布在30℃水浴中活 IDA Fe-IDA Cu- 化反应 ,所得的亲和膜环氧基密度可达 2。 4h 1.54mol/cm ! , [23] IDA对蛋白质和氨基酸具有最强的吸附力 。制备 配基 偶联的最佳条件为 : 用量为 IDA IDA 0.08g/mL 溶液浓度为 ,反应温度为 亲和膜所用的载体主要分为两大类:天然高分子材 NaCO (NaCO 1.5mol/L) 2 3 2 3 50℃,反应时间为 10h。以溶菌酶为标准蛋白,其等温吸附 料和人工合成高分子材料。目前,亲和膜的载体选择 线基本符合Langmuir形式,经曲线拟合得最大吸附量为 30mg/g干膜。 多倾向于前者,如纤维素及其衍生物,糊精,壳聚糖, 关键词:纯棉布,纤维素,金属螯合,IMAC,等温吸附 凝胶等。这类基质是非常好的亲和膜材料,并与常用 2+ 配基的兼容性好,而传统的琼脂糖和硅胶等球状颗 Abstract:AnewimmobilizedCu-IDAmetal-chelatedaffinity chromatography (IMAC)

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