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盐酸青藤碱抗肾间质纤维化实验探究 　 【关键词】 减轻肾损害 摘 要 目的:探讨盐酸青藤碱在 治疗 肾间质性纤维化中的作用及其发生机制，为临床上进一步防止肾小球和肾小管间质纤维化提供一些借鉴。 方法 :采用小鼠单侧输尿管结扎法诱导肾间质纤维化的动物模型，用盐酸青藤碱治疗，并设对照组（病理组）、假手术组、治疗组，检测血尿素氮（BUN）、血肌酐（SCr）、血清层粘连蛋白（LN）、纤维连接蛋白（FN）的含量，免疫组化法检测组织转化生长因子β 1 （TGF-β 1 ）的表达并进行肾脏病 理学 的观察。结果:3组比较，对照组BUN、SCr明显高于治疗组（Plt;0.01），略高于假手术组，但统计学比较无显著性差异（Pgt;0.05）;治疗组TGF-β 1 及FN均明显低于对照组、假手术组（Plt;0.01）;LN亦较对照组、假手术组低（Plt;0.05）。对照组、假手术组肾小管结构消失，代之以弥漫性纤维组织增生及单核细胞浸润;治疗组虽也肾小管萎缩、扩张，但病变较轻，绝大多数肾小管结构尚存，炎性细胞浸润也多呈局灶样分布。结论:盐酸青藤碱能降低BUN、SCr、FN、LN的含量以及TGF-β 1 表达，抑制间质纤维化，减轻肾损害，从而延缓肾脏疾病的 发展 。 关键词 肾间质性纤维化;层粘连蛋白;纤维连接蛋白;组织转化生长因子-β 1 大量动物实验和人类肾小球疾病临床病理 研究 发现肾小球疾病的发展和预后与肾小管、肾间质病变的严重程度密切相关，据多因素 分析 表明，肾小管及肾间质纤维化是决定肾衰竭进展的最重要 影响 因素，也是大部分肾小球疾病发展的共同最终通路 ［1］ ，有报道 ［2］ :在肾小球疾病的慢性进展中，肾小球滤过率的下降速率与肾小管、间质病变程度的关系更密切。因此，临床寻找有效药物阻止肾间质纤维化，延缓肾功能进展有重要意义，本实验旨在探讨中药盐酸青藤碱抗肾间质纤维化的作用机制。 1 材料与方法 　　1.1 实验材料 毕业论文 1.1.1 动物:雄性Wister大鼠40只，体重180g～200g，由同济医大学动物实验中心提供。 1.1.2 药物:湖南正清制药集团股份有限公司生产正清风痛宁缓释片。 1.1.3 试剂:LN试剂盒购于上海海军医学研究所生物技术中心，TNF-β 1 免疫组化染色试剂盒，购于北京中山生物技术有限公司。 毕业论文 1.1.4 仪器:722分光光度计、HPISA-1000全自动图象分析系统。 　　1.2 实验方法 1.2.1 分组:大鼠适应性地喂养7d，然后随机分 为3组，对照组（不施加任何药物的病理组）、假手术组、治疗组，每组各15只。 毕业论文 1.2.2 造模:三组大鼠均行右侧输尿管结扎术按照 参考 文献 ［4］ 进行。 论文代写 1.2.3 治疗:造模第2d，给假手术组小鼠每日按10mL/kg体重生理盐水灌胃，直至治疗结束，治疗组选用湖南正清制药集团产正清风痛宁缓释片按每日30mg/kg体重给小鼠灌胃，连续3W。 毕业论文 1.2.4 观察指标及标本采集:给药3W后，各组大鼠眼球后静脉丛取血，血尿素氮（BUN）、血肌酐（SCr）、测血清层粘连蛋白（LN）、组织转化生长因子-β 1 （TGF-β 1 ），然后处死大鼠，取出右肾，生理盐水冲洗，除去非肾脏组织，置于10%的甲醛液中固定，以备免疫组化及光镜观察。 毕业论文 1.2.5 结果判定及记录:肾小管间质病理改变的标准 ［3］ :肾小管扩张、萎缩，间质纤维化及炎细胞浸润，肾小管间质损害程度参照国内唐政分法分3级:Ⅰ级小管间质病变散在轻微，范围lt;15%;Ⅱ级小管病变呈灶性或小片状分布，范围≥15%，lt;50%;Ⅲ级小管病变呈片状或弥漫分布，范围≥50%。 1.3 统计学分析 计量资料均以x±s表示，采用方差分析，以Plt;0.05为有统计学意义。 　　 2 结果 毕业论文 2.1 各组大鼠血清BUN、SCr、FN、LN以及TGF-β 1 的含量 （见表1） 表1 各组大鼠血清BUN、SCr、FN、LN以及TNF-β1 的含量 注:与对照组比较*Plt;0.05，**Plt;0.01;与治疗组比较△Plt;0.05，△△Plt;0.01;对照组与假手术组比较BUN、SCr、FN、LN以及TNF-β1 的含量均无明显差异Pgt;0.05。 由表1知血BUN、SCr进行3组比较，对照组BUN、SCr明显高于治疗组（Plt;0.01），略高于假手术组，但统计学比较无显著性差异（Pgt;0.05）;治疗组FN及TGF-β 1 均明显低于对照组和假手术组TGF-β 1 、FN（Plt;0.01）;LN亦较