欧洲鳗鲡免疫球蛋白轻链基因的克隆及表达分析-华中农业大学学报.pdfVIP

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2017-09-11 发布于天津
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欧洲鳗鲡免疫球蛋白轻链基因的克隆及表达分析-华中农业大学学报.pdf

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欧洲鳗鲡免疫球蛋白轻链基因的克隆及表达分析-华中农业大学学报

第卷第期华中农业大学学报３４５　　　　　　　 Vol．３４　No．５年月 , ２０１５　９ JournalofHuazhon A riculturalUniversit Se．２０１５８１~８９ g g y p 欧洲鳗鲡免疫球蛋白轻链基因的克隆及表达分析冯建军郭松林林鹏　　　 / / , 集美大学水产学院鳗鲡现代产业技术教育部工程研究中心农业部东海海水健康养殖重点实验室厦门３６１０２１ ( ) , , 摘要通过技术克隆欧洲鳗鲡轻链基因全长序列命名为　 RTＧPCR AnuillaanuillaI cDNA AaIL g g g g , , . 其全长为１０１６bp开放阅读框为７１４bp编码２３８个氨基酸将该基因片段与 pETＧhis载体连接构建原核表达 , , , 载体在大肠杆菌中诱导表达其表达产物经和分析结果表明新增的 BL２１ SDSＧPAGE Westernblotting ２７ , , ku蛋白条带与预期值相符且与兔抗欧洲鳗鲡 IM 血清发生特异性显色反应证实了AaIL基因能够在大肠 g g ; : , 杆菌中以包涵体形式高效表达实时荧光定量 PCR检测结果发现 AaIL在欧洲鳗鲡各组织中均有表达其中 g , , 、、 ; 脾脏的表达量最高肾脏和心脏中也有较高的表达水平而肝脏肌肉鳃以及肠中的表达量较低欧洲鳗鲡经山 , , 羊肌肉注射后脾脏和肾脏的表达水平明显上升其峰值分别为第天和第天在脾脏的 IG AaIL ７１４ AaIL g g g , .