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紫苏叶提取物抗家兔动脉粥样硬化实验探究 　 作者：陈眷华 谭健民 徐在品 陈超 霍欣 邓小燕 张迪 简秀华 【摘要】 目的探讨紫苏叶提取物(FPE)对由高脂高胆固醇引起家兔动脉粥样化的影响。方法采用高脂高胆固醇饲喂法建立家兔动脉粥样硬化模型，分别测定正常对照组、高脂模型组、紫苏叶提取物低剂量组（0.17 g·kg-1）、中剂量组（0.5 g·kg-1）、高剂量组（1.5 g·kg-1）血清中TC，TG，LDL-C，HDL-C，MDA含量及SOD的活性，大体染色计算脂肪斑块面积比（PA），组织切片观察主动脉内膜增生(IH)。结果FPE组均能明显降低血清中TC，TG，LDL-C，MDA的含量（Plt;0.01），并能升高血清中HDL-C的含量（Plt;0.01）和SOD的活性（Plt;0.05），FPE干预组PA值下降明显，FPE中剂量组、高剂量组与高脂模型组比较具有统计意义 ［分别为（21.52±7.58）%，Plt;0.05；（15.82±3.64）%，Plt;0.01；（53.59±29.31）%］。病理切片显示，各用药组主动脉IH程度均小于高脂模型组，其中高剂量用药组AS程度最小。结论 紫苏叶提取物具有抗高脂饮食诱导家兔动脉粥样硬化的作用，其作用机制可能与其调节血脂与抗脂质过氧化有关。 【关键词】 动脉粥样硬化 紫苏叶提取物 血脂 脂质过氧化 家兔 动脉粥样硬化(Atherosclerosis, AS)是以动脉内皮细胞功能障碍、脂质沉积、炎症反应、平滑肌细胞迁移与增殖为主的病理改变，是导致心脑血管疾病的直接原因［1］。现代药理研究表明，紫苏叶的主要成分迷迭香酸及黄酮类化合物具有抗氧化、清除自由基及改善血液流变学等作用［2,3］。已有的实验研究结果表明紫苏叶具有抗动脉粥样硬化的药理基础，但目前有关其抗AS的实验研究还未见报道。本实验从紫苏药理理论出发，研究紫苏叶提取物抗家兔动脉粥样硬化作用，为拓展紫苏的临床应用提供实验参考。 1 材料与仪器 1.1 药物紫苏叶提取物(FPE)：紫苏叶购于贵阳市中药公司，由贵州大学动物科学学院基础兽医学实验室制备，药物浓度为每毫升含原生药1 g。 1.2 动物体重1.8～2.0 kg新西兰大白兔30只，雄性，由贵阳医学院实验动物中心提供。 1.3 饲料为机制颗粒饲料。基础饲料配方：玉米35％，小麦25％，麦麸35％，鱼粉2％，骨粉2％，盐1％；高脂饲料配方∶1.5 %胆固醇+ 10 %炼制猪油+ 88.5%基础饲料。 1.4 仪器与试剂旋片式真空泵（浙江黄岩求精真空泵厂）；RE-52旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂）；TDl-5A离心机（上海菲恰尔分析仪器有限公司）；旋转式切片机（德国，LEICA Rm2125）；光学显微镜（日本，OLYMPUS CX31）；722光栅分光光度计(上海精密科学仪器有限公司)；胆固醇（上海山浦化工有限公司，化学纯）；甘油三酯测定试剂盒、总胆固醇测定试剂盒、高密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒、低密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒均购自南京建成生物制品研究所。 2 方法 2.1 紫苏叶提取物的制备取干紫苏叶，适度粉碎后过20目筛备用，称取样品100 g，按固液比为1∶15加入新鲜蒸馏水，煎煮至沸腾后，再继续煎煮15 min，趁热4层纱布过滤，滤渣按固液比为1∶12加入新鲜蒸馏水重提1次，过滤，合并两次滤液，用文火将滤液浓缩至300 ml，待浓缩液冷却后，加入3倍量95%乙醇于4℃下放置12 h，沉淀后以3 000 r·min-1离心3 min，取上清液进行抽滤，滤液旋转蒸发浓缩至无乙醇味为止，最后定容至100 ml，即每毫升提取液含原生药1 g。 2.2 动物分组与给药实验分别设正常对照组、高脂模型组、FPE低剂组（紫苏Ⅰ组）、FPE中剂量组（紫苏Ⅱ组）、FPE高剂量组（紫苏Ⅲ组）（药物剂量分别为0.17，0.5，1.5 g·kg-1）。实验动物用基础饲料适应性饲养7 d，然后随机分为5组，每组6只。正常对照组饲喂基础饲料，高脂模型组饲喂高脂饲料，用药组饲喂高脂饲料并灌胃 FPE相应剂量的药物，同时模型组与正常对照组均灌胃等量蒸馏水。灌胃量为每只兔子3 ml·d-1，共8周。 2.3 观察指标 分别于实验前1天、第4周末和第8周末，清晨空腹行耳中动脉采血3.5～4.0 ml，分离血清，按各检测试剂盒的操作方法，测定总胆固醇 (TC)、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C)、丙二醛（MDA）的浓度及超氧化物歧化酶（SOD）的活性。 2.4 主动脉组织学观察动物于第8周末颈动脉放血处死，完整取出胸主动脉于10%福尔马林中固定12 h。按刘氏等方法［4］计算脂质斑块面积百分比（percentage of plaques