肺炎链球菌毒力相关基因检测及临床意义.docVIP

肺炎链球菌毒力相关基因检测及临床意义 　摘　要：目的：检测肺炎链球菌临床分离株毒力基因存在情况。方法：以临床分离出的91株肺炎链球菌作为研究对象，利用PCR法对肺炎链球菌5种毒力基因实施检测。结果：在全部的91株肺炎链球菌中LytA、PsaA、NanA、PspA、Ply这5种基因的检测阳性率分别为94.5%、85.7%、85.7%、61.5%、82.4%。结论：肺炎链球菌毒力因子是肺炎链球菌致病的基础，5种常见的毒力基因在肺炎链球菌检测中，其阳性率都比较高，此实验为进一步阐明毒力因子的作用机制并应用于指导抗肺炎链球菌新药和新型疫苗研制奠定了一定的基础。 关键词：肺炎链球菌；毒力基因；疫苗 肺炎链球菌（Streptococcus pneumoniae，S.pn）的致死率较高，由于其具有多重耐药菌，临床治疗始终很难攻克这一道难关。因此，只有不断的进行深入研究，探讨其毒力基因的发病机制及存在情况，从而开发出更加完善的抗病疫苗。笔者对临床分离出的91株肺炎链球菌作为研究对象，现将取得的试验进展报告如下。 1 资料与方法 1.1 一般资料：选取2007年3月～2012年4月临床分离出的91株肺炎链球菌，其中痰培养75株，血培养10株，分泌物培养4株，脑脊液培养2株。 1.2 检测方法：采用PCR法进行毒力基因的检测，PCR产物都要经过百分之一琼脂糖凝胶电泳，然后再使用Bio-Rad紫外凝胶成像分析仪进行检测，对检测到的阳性率分别进行记录以及分析。 2 结果 在全部的91株肺炎链球菌中LytA、PsaA、NanA、PspA、Ply这5种基因的检测阳性率分别为94.5%、85.7%、85.7%、61.5%、82.4%。详见表1。检测结果见图1～5。 毕业论文 表1 5种常见毒力基因检测结果情况[株（%）] 血清型/群（株） LytA（+） PsaA（+） NanA（+） PspA（+） Ply（+） 19（35） 35（100） 30（85.7） 33（94.3） 28（80.0） 论文代写 33（91.4） 6（6） 毕业论文 6（100） 5（83.3） 6（100） 4（66.7） 论文代写 5（83.3） 10（6） 6（100） 5（83.3） 论文代写 5（83.3） 4（66.7） 5（83.3） 论文代写 15（5） 论文代写 5（100） 5（100） 3（60.0） 1（20.0） 论文代写 5（100） 23（4） 4（100） 5（100） 4（100） 2（50.0） 2（50.0） 5（4） 4（100） 3（75.0） 3（75.0） 毕业论文 2（50.0） 1（25.0） 其他型（19） 论文代写 17（89.5） 论文代写 17（89.5） 15（78.9） 论文代写 11（57.9） 毕业论文 15（78.9） 未分型（12） 9（75.0） 8（66.7） 9（75.0） 4（33.3） 9（75.0） 总型（91） 86（94.5） 78（85.7） 78（85.7） 56（61.5） 75（82.4） 论文代写 图1 LytA基因片段的PCR产物（308 bp） 图2 PsaA基因片段PCR产物（839～930 bp） 毕业论文 图3 NanA基因片段PCR产物（500 bp） 图4 PspA基因片段PCR产物（1200～1800 bp） 图5 Ply基因片段PCR产物（329 bp） 3 讨论 抗S.pn感染的候选蛋白疫苗的主要是其毒力因子，如肺炎球菌溶血素（Pneumolysin，Ply），S.pn表面蛋白A（Pneumococeal surface protein A，PspA），S.pn表面黏附素A（Pneumococcal surfaca adhesinA，PsaA）、自溶素（Autolysin，Lyt）等，具有这些蛋白质的独立或联合疫苗在S.pn感染疾病的发病机制中起到了重要的作用[1]。因此，了解S.pn毒力因子的存在情况及致病机制对有助于对疫苗的研究。 Lyt在正常情况是无活性的，当S.pn菌体细胞壁合成停止或营养不足或抗生素处理时，Lyt便从LTA上分离，作用于