胆汁性肝硬化大鼠肾脏组织的HO-1的表达和肾细胞凋亡的分析研究.pdfVIP

中文摘要 胆汁性肝硬化大鼠肾脏组织的 H0—1表达和肾细胞凋亡的研究 摘 要 肝硬化肾功能损害是肝硬化患者死亡的主要原因之一， 表现为自发性少尿或无尿、氮质血症、稀释性低血钠和低尿 钠等。肝硬化时肾功能损害的原因未明，可能是由于严重肝 功能障碍导致肾脏的血流动力学改变所致，其’肾脏血流动力 学改变的特征是：肾内血管收缩，肾血流重新分布，血流自 肾皮质向髓质分流，。肾皮质缺血，肾小球入球小动脉收缩， 肾小球滤过率下降。尽管此时体循环扩血管因子可因过度产 生和火活障碍而升高，但肾脏缩血管因子活性却占优势。因 此，随着肝硬化病程加重，肾血管收缩逐渐加剧，肾血管阻力 增加，导致肾血流灌注量和肾小球滤过率降低，最终导致迸行 性少尿、无尿、血肌酐和尿素氮水平升高，从而发生肝肾综 合征(Hepatorena!syndrome，HRS)。 近年研究发现一氧化碳(Carbon oxide，NO)一样，也是一种重要的气体信号分子， 化氮(Nitric 除参与中枢神经系统的信号传递外，它在血管张力调节中也 超重要作用。这一发现提示我们研究一氧化碳是否也参与了 肝硬化时肾脏血管的调节。HO是血红素分解代谢的限速酶 ，催化血红素转化成为等分子量的胆绿素、一氧化碳和游离 铁。 自从1972年Kerr首次提出凋亡的概念，对凋亡的研究得 到了广泛、深入的发展。凋亡系形态学现象，具有特异性的 中文摘要 形态学改变，表现为细胞核，包括染色质密集于皱缩的核膜下 呈边缘化，胞核高度凝集致密，晚期染色体断裂，核碎裂，直至 形成凋亡小体。从基因角度看凋亡受到各种基因调节，例如： 发生，Bax过表达促进凋亡的发生。 Bileduct 目的：本实验采用胆总管结扎(common 硬化肾脏的病理变化，检测肾组织中HO．1的表达与定位， l肾组织中丙二醛含量的变化以及肾脏凋亡情况，并同时检测 和凋亡有关的肾组织Bcl．2、Bax蛋白表达水平。旨在探讨 肝硬化进程中l肾脏的损伤情况，及其在HRS发生机制中的 作用。 模型，共30只。随机分为假手术组(sham 周组(2wk)和5周组(5 wk)。采用病理染色观察肝硬化形 成情况，病理及电镜观察相对应的肾脏组织学改变：应用免 疫组化技术观察HO。l蛋白在肾脏的表达和分布；留取大鼠24 小时尿及术中采集静脉血检测血肌酐，并计算内生肌酐清除 率；应用分光光度比色法检测‘肾组织丙二醛(MDA)含量； situend 应用原位缺口末端标记技术(in labelling 免疫组化法检测肾组织Bcl．2，Bax蛋白表达水平，病理图象分 析系统处理切片染色结果。 wk时肝纤维化形成，5 结果：病理观察显示CBDL大鼠2 wk时肝硬化形成。在2wk及5wk各组大鼠肌酐清除率逐渐降 中文摘要 示，肾小管上皮细胞有脱落、坏死现象；电镜显示基底膜不 规则增厚，系膜区增宽，上皮细胞足突融合。在5wk组大鼠 肾脏HO．1阳性细胞数及细胞浆内黄染颗粒减少，阳性面积 渐增加。’肾组织经TUNEL染色后，可见凋亡细胞簇状堆积， 核膜变厚，染色质固缩或呈块状堆积于核膜边缘，有的肾小 管甚至出现坏死、脱落和细胞聚集现象。5wk组肾组织凋亡 与Bax表达分别呈下降和上升趋势，进一步证明凋亡存在并 于凋亡基因的激活与抑制有关。从MDA测定值与凋亡面积 的相关分析看，两者呈正相关，假手术组(产0．9410)， P0．01)。 结论： 1 CBDL CBDL大鼠随着肝硬化的进展肾脏有病理组织 中文摘要 学改变，大鼠的