超高压水射流对五味子中五味子醇甲含量影响探究.docVIP

超高压水射流对五味子中五味子醇甲含量影响探究 　 作者：张小荣，徐柏三，王盛民，王懿萍，陈波，赵冬梅，陶敏 【摘要】 目的研究超高压水射流对五味子提取液中五味子醇甲含量的影响。方法通过150～350 MPa的超高压水射流处理五味子水提醇沉液，采用薄层色谱法定性鉴别和高效液相色谱法定量测定五味子提取液中五味子醇甲的含量。结果不同超高压水射流处理五味子提取液后，五味子的薄层图谱中斑点个数、大小及Rf值无显著差异；高效液相色谱中峰个数及形状亦无明显差异，且经超高压150～350 MPa水射流处理后，五味子中五味子醇甲的含量较五味子原液均有不同程度的升高，250 MPa压力处理后含量升高最多，更高的压力使五味子醇甲开始有下降的趋势。结论该研究可为超高压水射流对中药有效成分的影响提供依据，为五味子药材的药品、食品及保健品的开发研究进行有益的探索。 【关键词】 超高压水射流； 高效液相色谱法； 薄层色谱法； 五味子； 五味子醇甲 五味子为木兰科植物五味子Schisandra chinesis (Turcz.)Baill.的干燥成熟果实，主产于我国东北地区，故习称“北五味子”。五味子具有收敛固涩、益气生津、补肾宁心之功效，临床上常用于久嗽虚喘，梦遗滑精，短气脉虚，内热消渴，心悸失眠等［1］，《神农本草经》将其列为上品。五味子的化学成分主要有木脂素、挥发油、有机酸、萜类及多糖等多种化学成分［2］，木脂素是其重要的有效成分，具有保肝护肝、对中枢神经系统作用及抗氧化等作用［3］。五味子醇甲是五味子中木脂素类的主要成分之一，具有良好的水溶性，为五味子注射剂等制剂中的主要活性成分。药理学研究表明，五味子醇甲有明显的安定、镇静及抗惊活性，且对大脑皮层的兴奋抑制过程有调节作用。 　　超高压技术及超高压水射流技术都是近几十年发展起来的新兴技术，在食品加工及医药灭菌领域现已取得初步成效，超高压技术已用于五味子饮料的生产加工，不仅确保了质量，同时还提高了生产效率，减少了设备投资［4］。为促进超高压水射流技术在饮料及医药行业中的应用，本文探讨了经超高压水射流处理后五味子水提液中五味子醇甲的含量变化情况，以期为进一步进行超高压水射流提取和超高压水射流灭菌等研究提供基础实验数据，并进行有益的探索。 　　1 仪器与材料 　　LC-20AT高效液相色谱仪，包括LC-20AT泵、SPD-20A紫外检测器、AT-330柱温箱、Class-VP数据处理系统、7725i进样阀（日本岛津公司）；DPSB-3040型超高压水射流系统（南京大地水刀股份有限公司）。 　　五味子药材购自于四川省峨眉山市药材公司，经本院王盛民教授鉴定为木兰科植物五味子Schisandra chinensis (Turcz.）Baill.的干燥成熟果实；五味子醇甲对照品购自中国药品生物制品检定所，批号：110857-200406；乙腈为HPLC级（美国Fisher公司）；所用水为超纯水；其余试剂均为分析纯。 　　2 方法与结果 　　2.1 供试品溶液的制备取五味子果实，洗净烘干后，粉碎成粗粉，称取本品约300 g，精密称定，10倍量水煎煮2次，1.5 h/次，合并提取液，静置、离心，抽滤后定容至7 000 ml。量取五味子水提取液5 000 ml，用超纯水稀释至15 L，分别在150，200，250，300和350 MPa压力条件下，经超高压水射流处理，将各溶液摇匀、静置，分别取未经处理和各处理液的上清液过0.45 μm微孔滤膜，分别标号为0，1，2，3，4，5号，作为供试品溶液。 　　2.2 对照品溶液的制备精密称取在40℃干燥24 h的五味子醇甲对照品7.5 mg，置50 ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即制成每毫升含五味子醇甲0.150 mg的对照品溶液。 　　2.3 五味子的薄层色谱鉴别照薄层色谱法试验，吸取“2.1”和“2.2”项制备的供试品溶液和对照品溶液各10 μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚（30～60℃）-甲酸乙酯-甲酸（15∶5∶1）的上层溶液为展开剂，展开，取出晾干，置紫外灯（254nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。斑点较为圆整，分离效果好，各供试品斑点大小及Rf值无显著差异。 　　2.4 HPLC色谱条件Symmetry C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）色谱柱（美国Waters）；流动相为甲醇-水（70∶30）；检测波长273 nm；流速0.8 ml·min-1；柱温30 ℃；进样量10 μl。在该色谱条件下，理论塔板数按五味子醇甲峰计算不低于2 000，且样品中五味子醇甲与其他组分分离效果良好，对照品及样品的色谱图见图1。 　　2.5 线性关系考察分别精密吸取“2.2”项下制备的