纤维素酶解条件和连续酶解工艺地研究.pdfVIP

第 13 卷 第4 期 黑 龙 江 八 一 农 垦 大 学 学 报 13 （4 ）：79～85 2001 年 12 月 J.of Heilongjiang August First Land Reclamation University Dec. 2001 文章编号：1002-2090(2001)04-0079-07 纤维素酶解条件和连续酶解工艺的研究 汤晖，于淼，汤树德 （黑龙江八一农垦大学，密山 158308） 摘 要：在实验室条件下，采用不同的化学方法预处理的秸杆对其纤维素酶解效率影响的顺序为： 强碱＞石灰＞氨化＞未处理；高温＞常温；水洗脱木素＞未水洗。在一定的酶浓度下，提高底物浓度 采用较低的酶解温度并延长酶解时间，可获得较高的糖浓度和提高糖化率。利用纤维素对纤维素酶的 吸附——解吸特性，通过间断抽吸糖液和等量稀释，同时添加定量底物，所建立的纤维素酶循环有限 连续酶解工艺，是一种耗酶量少而高效糖化综纤维的简易可行工艺。 关键词：秸杆预处理；纤维素酶解条件；连续酶解工艺 中图分类号：TQ925.9 文献标识码：A 通过纤维素酶降解天然纤维素物质获取糖液，是半个世纪来倍受关注的课题，其意 义无需赘述。然而，由于受多种工艺技术的经济制约，故至今难以达到可接受的工业生 产规模。根据现有成果和文献分析，从工艺技术考虑，实现天然纤维素酶解糖化的工业 [1,2] 生产，除了具有高酶活力、酶系组成合理 和价格低的纤维素酶制剂以外，就酶解工艺 [3,4] 来说，选择对天然纤维物质进行预处理的简易有效方法，无疑是制造酶解的前提条件 。 [5,6] 解除酶反应体系中产物积累对酶活性的反馈抑制 ，才能充分发挥限量酶的酶解作用， 提高酶反应速度，解决纤维素酶的回收和循环利用，延长酶的寿命，才能提高单位酶的 得糖量，降低耗酶量，最终建立纤维素酶高效连续糖化工艺，便能大幅度降低工艺成本， 实现有竞争力的工业生产。 本文仅从作物秸杆的化学预处理方法、酶解工艺条件和建立连续糖化工艺进行了实 验研究，获得了较好的效果，初报如下。 1 材料和方法 1.1材料 1.1.1小麦秸、玉米秸和稻草：为本地当年新鲜成熟秸杆，风干后保存备用。 1.1.2纤维素酶由海林市原万力达纤维素酶厂生产的粗酶粉，其滤纸酶活（FPA）为21.85 IU/g（国际单位）。 1.1.3实验中皆采用化学纯试剂。 收稿日期：2001-09-03 作者简介：汤晖（1972-），男，讲师，北京农业大学在读硕士研究生。 80 黑 龙 江 八 一 农 垦 大 学 学 报 第13 卷 1.2测定方法 1.2.1纤维素酶活性测定，采用滤纸酶活（FPA），以国际单位（IU）表示，即在 1 min 内产生1μmol葡萄糖的酶量为 1 IU。 1.2.2还原糖采用DNS法比色测定。 还原糖量×0.9 1.2.3糖化率（%）= ×100 底物量 实验布置方法在文中注明。 2 结果与讨论 2.1秸杆预处理方法对纤维素酶解效果的影响 由于成熟秸杆中的纤维素，在不同程度上处在木质素的包蔽鞘中，而木质素是一种 高度抵抗生物降解的高分子聚合物，纤维素本身也是一种高分子聚合物，还具有一定的 结晶度，其聚合度和结晶度愈高，木质素的包蔽愈严重。因此，纤维素的生物降解也就 愈困难。为了克服木质素的障碍，降低天然纤维素的聚合度和结晶度，以提高天然纤维 素对纤维素酶降解的敏感性，所以新鲜秸杆必须经过预处理，为酶解纤维创造前提条件 [3,4] 。不同的预处理方法必将产生不同的酶解效果。 2.1.1秸杆预处理方法 将风干的新鲜秸杆切成小段 2cm左右备用，经不同的化学方