生物分离工程第六章节 离子交换与吸附.pptVIP

洗脱方式 离子交换完成后，将树脂吸附的物质重新转入溶液的方法 洗脱方法 （1）改变溶液pH值 （2）改变溶液离子强度 树脂再生 是指使离子交换树脂重新具有交换能力的过程 酸性阳离子树脂 酸-碱-酸-缓冲溶液淋洗 碱性阴离子树脂 碱-酸-碱-缓冲溶液淋洗 方式有：顺流再生和逆流再生 硬水软化 离子交换应用实例 离子交换法提取蛋白质 较无机离子的离子交换平衡复杂，其吸附行为与离子间的静电引力、氢键、疏水作用以及范德华力有关 蛋白质是生物大分子物质，因此，其扩散行为也较无机离子复杂 Some of the charged regions which will influence ion exchange Different proteins have different charges and different patterns of surface charge Basis for selectivity NH3 R COOH + NH3 R COO + - R NH2 COO - Low pH Positive charge High pH Negative charge Hydrogen gained Hydrogen lost Effect of pH on charge - + Overall charge on protein NH3 R COOH + NH3 R COO + - R NH2 COO - acid isoelectric point alkaline excess positive charge balanced positive and negative charge excess negative charge pH 3 10 Titration curves 蛋白质离子交换分离的基本步骤 平衡 上样吸附 洗脱 再生 + + + + + + - - - - - - - anion exchange bead Equilibration Sample application and wash - - - - - - - - - - - + + + + + + - - - - Elution - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - + + + + + + + + + + + + - - Regeneration - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - + + + + + + Sample application and wash Elution Equilibration Regeneration - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + - - - - - - - - - - - 常用于蛋白质提取分离的离子交换剂 要求：良好的亲水性、具有较大的均匀网格结构、粒度越小分辨率越高 种类：多糖类 离子交换纤维素 交联葡聚糖 交联琼脂糖 聚乙烯醇类 Mono系列 Amersham Pharmacia 本章作业 P173 T1-10题 影响吸附的主要因素？（T5重复） 亲和吸附的原理和特点是什么？ 常用的离子交换树脂类型有哪些？（T7重复） 影响离子交换速度的因素有哪些？（T8重复） 用于蛋白质提取分离的离子交换剂有哪些特殊要求，主要有哪几类？ 离子交换(ion exchange) 概念：利用离子交换树脂作为吸附剂，将溶液中的待分离组分，依据其电荷差异，依靠库仑力吸附在树脂上，然后利用合适的洗脱剂将吸附质从树脂上洗脱下来，达到分离的目的。 离子交换树脂的结构 具有三维空间立体结构的网络骨架 联接在骨架上的活性基团 活性基团所带的相反电荷的活性离子（可交换离子） 树脂的网络骨架（类似于大孔树脂） 离子交换树脂三维空间立体结构 离子交换的分类 按活性基团分类，可分为阳离子交换树脂(cation exchange)（含酸性基团）和阴离子交换树脂(anion exchange)（含碱性