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牛Asia 1 型口蹄疫病毒感染性克隆的构建
生 物 工 程 学 报 Chin J Biotech 2009, November 25; 25(11): 1621-1626
journals.im.ac.cn Chinese Journal of Biotechnology ISSN 1000-3061
cjb@im.ac.cn © 2009 Institute of Microbiology, CAS CSM, All rights reserved
动物及兽医生物技术
Asia 1
1 1 1 1 2 1
李爽 , 张润祥 , 宋鸽 , 高明春 , 刘湘涛 , 王君伟
1 , 150030
2 , 730046
: 本研究在完成Asia 1 型口蹄疫病毒(FMDV)As01 株全基因组测序的基础上, 采用融合PCR 扩增得到含有 15 个
C 碱基的 5端片段(约 1800 bp), 并利用长片段PCR 扩增得到基因组3端片段(约6700 bp) 。再利用单一的酶切位点将2
个片段克隆到pBluescript SK 载体中, 从而获得携带As01 株基因组全长 cDNA 的重组质粒pBSAs 。将该质粒线性化后
作为模板体外转录并转染BHK-21 细胞, 可观察到典型的细胞病变。对收获的病毒采用RT-PCR 、间接免疫荧光和电镜
观察等检测及鉴定, 结果表明, 拯救出了具有感染性的 Asia1 型 FMDV 。拯救毒与亲本毒对乳鼠的致病力(LD50)差异不
显著, 具有相似的生物学特征。该感染性克隆的构建, 为深入研究 FMDV 的致病机理及开发新型疫苗提供了有效的反
向遗传操作平台。
: 口蹄疫病毒, 全长 cDNA, 感染性克隆, 反向遗传, 病毒拯救, 体外转录
Rescue of bovine Asia 1 serotype foot-and-mouth disease virus
from a full-length cDNA clone
1 1 1 1 2 1
Shuang Li , Runxiang Zhang , Ge Song , Mingchun Gao , Xiangtao Liu , and Junwei Wang
1 College of Veterinary Medicine, Northeast Agriculture University , Harbin 150030, China
2 Lanzhou Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Lanzhou 730046, China
Abstract: After sequencing the Asia 1 foot-and-mouth disease virus (FMDV) (As01 strain), we amplified the two fragments
covering the whole genome by overlapping PCR and long P
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