化学发光免疫检测技术在临床检验中应用.pptVIP

化学发光免疫检测技术在临床检验中应用.ppt

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化学发光免疫检测技术在临床检验中的应用 定 义 免疫学检测主要是利用抗原和抗体的特异性反应进行检测的一种手段。它可以利用同位素(荧光素)酶、化学发光物质等对检测信号进行放大和显示。 夹心法 免疫诊断现状 中国免疫诊断现状 中国临床免疫定量诊断现状亟待改善 化学发光免疫诊断技术 已成为免疫定量诊断的主流 昂贵的成本价格严重阻碍 化学发光免疫诊断技术造福中国人民 临床呼唤符合国情的解决方案 中国即将迎来免疫定量诊断技术普及的新高潮 四种检测方法比较 化学发光酶免疫分析 用参与某一发光反应的酶来标记抗原或抗体,免疫反应后,加入发光试剂,测定发光体系的发光强度来确定抗原或抗体的含量。 两大体系 辣根过氧化物酶(HRP)体系 碱性磷酸酶(AP)体系 辣根酶发光信号示意图 两大体系的比较 碱磷酶体系:水解反应,起光较慢,发光强度较弱,灵敏度较高。 辣根酶体系:氧化还原反应,起光较快,发光强度较大。 化学发光在临床检测中的 主要应用 肿瘤标志物检测 甲状腺功能检测 生殖内分泌激素系列 糖尿病检测 传染病检测系列 肝纤维化系列 一、肿瘤标志物的检测 1、肿瘤标志物(tumor marker,TM) 是指由肿瘤组织产生的 存在于肿瘤组织本身,或分泌至血液或其他体液, 或是因肿瘤组织刺激,由宿主细胞产生的 反映肿瘤的存在和生长,含量明显高于正常参考值的一类物质。 通过对这类物质的分析,能帮助人们从正常组织中区别肿瘤或测定肿瘤细胞核、细胞质以及对细胞膜上的特性进行分析,以此作为辨认肿瘤细胞的标志。 2、肿瘤标志物的分类 (1)、肿瘤胚胎性抗原标志物 该类蛋白质即前文所提到的因返祖现象的出现,而产生的肿瘤标志物。虽然该类标志物与肿瘤组织不一定具有特定的相关性,但与肿瘤的发生存在着内在的联系。 例:甲胎蛋白(alpha-fetoprotein, AFP) 癌胚抗原(carcinoembryonic antigen, CEA) (2)、糖类抗原标志物 该类物质是肿瘤细胞表面的抗原物质,或肿瘤细胞所分泌的物质。这类标志物的出现为临床肿瘤的诊断带来方便,但其命名无规律可言。有些是肿瘤细胞株编号,有些是抗体物质的编号。该类标志物又可分为两类 ①糖类高分子粘蛋白抗原 例:癌抗原CA125 癌抗原CA15-3 ②血型类抗原 例:癌抗原CA19-9 癌抗原CA50 (3)、酶类标志物 酶及同工酶是最早出现和使用的肿瘤标志物之一。肿瘤状态时,机体的酶活力就会发生较大变化,这主要是因为: ①肿瘤细胞或组织本身诱导其他细胞和组织产生异常含量的酶; ②肿瘤细胞的代谢旺盛,细胞通透性增加,使得肿瘤细胞内的酶进入血液,或因肿瘤使得某些器官功能不良,导致各种酶的灭活和排泄障碍。 例: 前列腺特异性抗原(prostate specific antigen, PSA) 神经原特异性烯醇化酶(neuron-specificenolase, NSE) (4)、激素类标志物 当具有分泌激素功能的细胞癌变时,就会使分泌的激素量发生异常。这种现象被称为正位激素异常。 而正常情况下不能生成激素的那些细胞,转化为肿瘤细胞后所产生的激素,或者是那些能产生出激素的细胞癌变后,分泌出的是其他激素细胞所产生的激素,这种现象被称为异位激素异常。 衡量异位激素异常的条件是:①有非内分泌腺细胞合成的激素; ②某种内分泌细胞却分泌其他分泌腺细胞的激素; ③肿瘤患者同时伴有分泌异常综合征; ④这类肿瘤细胞在体外培养时也能产生激素 ⑤肿瘤切除或经治疗肿瘤消退时,此种激素含量下降,内分泌综合征的症状改善。 例: 人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonagotropin, HCG) 人胎盘催乳素(PRL) (6)、其它蛋白质类标志物 另外还有一些早期发现的蛋白类肿瘤标志物,特异性稍差,但检测方法相对比较容易,因而常作为常规检测项目,用以肿瘤普查。 例: β2-微球蛋白(β2-microglobulin, β2-MG) 血清铁蛋白( Serum Ferritin, SF) 3、肿瘤标志物的检测意义 高危人群中恶性肿瘤的早期检测 预后应用 治疗监测 肿瘤复发的早期检

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