载HIF-1α反义寡核苷酸纳米粒对兔VX2肝移植瘤TACE术后肿瘤新生血管影响实验的研究.pdf

纳米载体材料制备包载HIF．1a反义寡核苷酸纳米粒子作为纳米载药控释系统的可 行性；第三部分旨在通过动物实验和分子生物学方法进一步评价携带HIF．1a反义 寡核苷酸纳米粒子对兔VX2肝移植瘤TACE术后肿瘤新生血管生成的抑制作用，进 而为临床上肿瘤的治疗提供新的思路。 实验材料和方法 1．构建兔VX2肝移植瘤模型 将冷冻的VX2肿瘤细胞株组织块复苏、剪碎，制成悬液，接种于兔大腿部皮 下制备荷瘤兔；切取荷瘤兔后腿肿瘤边缘的灰白色鱼肉样组织，剪成约lmm3大 小瘤块备用；实验兔采用剑突偏左肋缘下纵行切开，直视下瘤块直接种植法将瘤 组织块植入肝左叶内，建立兔VX2肝移植瘤模型；2周后行肝脏螺旋CT双期动 态扫描．观察肝内肿瘤生长情况。 2．制备载HIF．1a反义寡核苷酸PLGA纳米粒 应用复乳化．溶剂挥发法制备包载HIF．1a反义寡核苷酸PLGA纳米粒子，并 固定其他因素，选择不同的PVA浓度和乳化速度，观察其对制备的纳米粒粒度和 载药量的影响：应用电镜和粒度测定仪对制得的纳米粒进行形态观察和粒径测定： 应用高教液福色谱法测定纳米粒的载药量和包封率并进行体外释药试验；应用光 学显微镜及肉眼观察载药纳米粒与碘油混悬液的物理稳定性。 3．实验动物分组及处理方案