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同济基础医学院解剖学系 硕 士 研究生课程简介 课程名称：现代组织化学技术 课程代码：510.514 英文名称：Modern Histochemical Technology 课程类型： √讲授课程 √实践（实验、实习）课程 研讨课程 其它 考试方式：笔 试 教学方式：理论课、实验课 适用专业：生物学、医学 适用层次： √硕士 博士 开课学期：第一学期 总学时/讲授学时：32 学分： 2 先修课程要求： 课程组教师姓名 职 称 专 业 学术专长 刘能保 教授 组织胚胎学 李　和 教授 组织胚胎学 刘德明 教授 组织胚胎学 刘胜洪 教授 组织胚胎学 王小丽 副教授 组织胚胎学 李宏莲 副教授 组织胚胎学 沈建英 讲师 组织胚胎学 叶翠芳 讲师 组织胚胎学 贺 军 讲师 组织胚胎学 教学大纲（章节目录）： 授课对象：本课程主要为基础和临床各学科攻读硕士学位研究生开设。 课程特点：理论与实践相结合，掌握熟悉各种组织化学、免疫组织化学和原位杂交的基本理论知识，在此基础上通过亲自动手进行部分实验，以熟悉和了解部分技术的操作程序。 课程目的：通过学习，帮助硕士学位研究生掌握熟悉现代组织化学的基本理论知识，熟悉和了解部分技术的操作程序，为在其学位论文实验中应用这些技术建立初步基础。 授课形式：理论与实践相结合方式。先讲授理论知识，在此基础上，开展部分实验课，在教师指导下，让学员亲自动手操作，熟悉和了解部分技术的操作程序。 选课要求：学生应具有医学本科毕业的知识基础。 教学大纲（主要讲授内容简介）： 第一篇 组织化学 第一章 概述 1．组织化学的定义、组织化学与细胞学、组织学和生物化学的关系，组织化学的基本原理。 2．组织化学的发展简史。 3．组织化学技术的基本要求。 第二章 组织化学标本的制备 1．组织固定的目的。常用固定剂的作用：甲醛、戊二醛和乙醇。固定液的选择。 2．组织切片的制备：石蜡切片法、恒冷箱切片法、冷冻干燥法和冷冻替代法。 3．常用的组织化学定量方法。 第三章 若干组织化学染色技术 目的要求 1．显示多糖的高碘酸Schiff(PAS)反应。 2．显示DNA的福尔根反应，显示DNA和RNA的甲绿派若宁法。 3．醛复红染色法。 4．酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、5’-核苷酸酶、葡萄糖-6-磷酸酶、三磷酸腺苷酶、非特异性酯酶、乙酰胆碱酯酶、细胞色素氧化酶、单胺氧化酶、过氧化物酶、琥珀酸脱氢酶、乳酸脱氢酶和一氧化氮合酶的显示法。 第二篇 免疫组织化学 第一章 概述 1．免疫组织化学的提出，免疫组织化学与组织化学、免疫化学和生物化学的关系。免疫组织化学的基本原理。 2．免疫组织化学的发展简史。 3．免疫组织化学技术的基本要求。 第二章 抗原和抗体 1．抗原的定义，完全抗原，半抗原，抗原的特异性，抗原决定簇，抗原的异物性。 2．抗体的定义、分子结构和免疫活性。 第三章 免疫组织化学技术的原理 1．免疫荧光技术：抗原直接定位法、抗体直接定位法、抗原间接定位法、抗体间接定位法和免疫荧光双标记法的原理。 2．免疫酶技术：抗原间接定位法、酶桥法、PAP法和免疫酶双标记法的原理。 3．亲合素-生物素法：LAB法、 BAB法、 ABC法和 SABC法的原理。 4．免疫胶体金技术：免疫胶体金染色法，蛋白A胶体金法，胶体金双标法的原理。 第四章 免疫组织化学标本的制备 1．固定的目的，灌注固定的方法。 2．石蜡包埋切片法、恒冷箱切片法和振动切片法。 第五章 若干免疫组织化学标记程序 1．免疫单标记程序：光镜水平的免疫荧光染色（间接法）、PAP法、ABC法、SABC法、 免疫胶体金法、蛋白A胶体金法和免疫金银染色法以及电镜水平的PAP法包染色和PAP法包埋后染色。 2．免疫双标记染色程序：光镜水平的PAP-PAAP双重染色、免疫荧光双重染色和PAP-(-Gal双重染色以及电镜水平的PAP-(-Gal双重染色、DAB-TMB双重染色和胶体金又重染色。 第三篇 原位杂交组织化学 第一章 原位杂交组织化学的分子生物学基础 1．核酸的分子结构：核酸的化学组成，核酸的一级结构，高级结构。 2．核酸的特性：DNA的变性与复性，RNA的功能，遗传信息的传递（DNA的复制、转录和翻译）。 第二章 核酸分子杂交概述 1．核酸分子杂交的定义和基本原理。 2．常用核酸探针的种类和特点：cDNA探针、cRNA探针、寡核苷酸探针。 3．核酸探针标记的基本原理：放射性同位素标记（缺口平移法、随机引物延伸法、末端标记法、体外转录法），非放射性标记（酶促反应标记、化学标记）。 4．常用核酸探针标记技术：寡核苷酸探针3’-末